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頭頚部癌患者における末梢血中微量癌細胞の同定法の開発と個別化癌治療への応用

开发一种识别头颈癌患者外周血中微量癌细胞的方法及其在个性化癌症治疗中的应用

基本信息

批准号：
18659497
负责人：
古屋信彦
金额：
$ 2.18万
依托单位：
Gunma University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2006
资助国家：
日本
起止时间：
2006 至 2008
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-18659497/
关键词：
micrometastasis real time quantitative RT-PCR cytokeratin CK-19 papilloma virus mcrometastasis pailloma virus cancer stem cell CD44 BMI1

项目摘要

進行頭頸部癌患者の末梢血液中の微量癌細胞の同定に関して、昨年度までは、末梢血液中の有核細胞を濃縮することで、CK-19の発現から検出を試みていた。実験レベルで10の6乗分の1個の癌細胞検出が可能だが、血液中から癌細胞は検出されなかった。今年度は、末梢血から直接RNAを抽出し、RT-PCRでCK-19遺伝子を増幅する方法を試みた。しかし、同様に癌細胞を末梢血液から検出することはできなかった。中咽頭癌の病理組織標本からの、ヒトパピローマウイルス検出は、調べ得た7症例からはウイルスDNAを検出することはできなかった。ホルマリン固定標本からのPCRは、鋳型となる標的ウイルスDNAは200bp程度のごく短いものなので、DNAが断片化していたとしていても、問題ないと考えてた。PCR反応の阻害物質が、ホルマリン固定やパラフィン包埋などで試料に混入しているかもしれない。もしくは、中咽頭の発癌にはパピローマウイルスは関与していないのかもしれない。現在、新鮮な手術摘出標本を用い、PCR阻害物質が混入しない条件で、中咽頭癌組織にパピローマウイルスゲノムが混入していないが検討している。折しも、子宮頸癌についてはパピローマウイルスが発癌に強く関わっている証拠が十分であり、ワクチンが承認され、子宮頸癌のリスクの高い人にワクチン接種することが認められた。中咽頭癌でもウイルス発ガンの可能性が示唆されれば、ワクチン接種で癌の予防が可能と期待される。

For patients with head and neck cancer のの trace cancer cells in peripheral blood の with fixed に masato して, yesterday's annual までは, peripheral blood の nucleated cell を enrichment することで, CK - 19 の発 now から検 try out をみていた. Be 験レベルで 10 の乗 6 points の 1 の cancer cells may 検 out がだが, blood から cancer は検 out されなかった. This year, ら, direct RNAを extraction from peripheral blood らら, <s:1>, RT-PCRでCK-19 spore 伝を increase する method を test みた. The lesion is に, the same type of に cancer cells を, the peripheral blood するら検, するでとででななったった. の pathological tissue samples of those cancer からの, ヒトパピローマウイルス検 out は 7 cases, adjustable べたからはウイルス DNA を検 out することはできなかった. ホルマリン fixed specimens からの PCR は, where となる mark ウイルスは 200 bp DNA level のごく short いものなので, が DNA fragment していたとしていても, problem ないと exam えてた. PCR anti 応の resistance against material が, ホルマリン fixed やパラフィン embedding などで sample に mixed with しているかもしれない. The occurrence of cancer in the middle pharynx is related to にパピロパピロパピロウウススス and <s:1> てななななてウれなれなれなれな. Now, pick the fresh な surgery specimens をが with い, PCR resistance against substances mixed with しなでい conditions, those in the cancer tissue にパピローマウイルスゲノムが mixed with していないが beg し検ている. Folding しも, cervical cancer についてはパピローマウイルスが発 carcinoma に strong く masato わっている card 拠が very であり, ワクチンが admitted され, cervical cancer のリスクの high いにワクチン vaccination することが recognize められた. In those cancer でもウイルス発ガンがの possibility in stopping されれば, ワクチン vaccination might ので carcinoma to prevent がと expect される.