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転写因子AP-1やNF-κBと協奏的に働く破骨細胞の分化因子のクローニング

与转录因子 AP-1 和 NF-κB 协同作用的破骨细胞分化因子的克隆

基本信息

批准号：
18659619
负责人：
宮沢裕夫
金额：
$ 2.11万
依托单位：
Matsumoto Dental University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2006
资助国家：
日本
起止时间：
2006 至 2007
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-18659619/
关键词：
膜透過性転写因子融合蛋白時間軸破骨細胞融合タンパク

项目摘要

AP-1やNF-kBなどの転写因子は破骨細胞の分化に必須であることがノックアウト動物の解析から明らかとなっている。しかし、これらの転写因子は、他の細胞にも普遍的に発現し、細胞の増殖やストレス応答など多彩な作用を有する。本研究では、転写因子に膜透過性ドメイン(PTD)を融合させたタンパクを作成し、破骨細胞前駆細胞に経時的に導入する方法を作成することを目指している。平成19年度は前年度に引き続き、動物細胞での発現を目指して以下の結果を得た。(1)PTD融合タンパクを直接細胞に導入する実験系の作成。NF-kBおよびAP-1それぞれの転写因子ファミリーのcDNAを、PTD融合タンパク発現ベクターに組み込み、動物細胞株HEK293に発現させた。しかし、想定した以上にタンパク分解が見られ、全長を満たす転写因子が発現できなかった。そこで、NF-kBを活性化させるIKK複合体の制御を行うためPTD融合タンパクを用いて検討した。IKK複合体のサブユニット間の結合に必要なNBD領域をPTDと融合タンパクとして作成し、マウス骨髄細胞およびヒト末梢血単球に作用させた。いずれの細胞でも、NF-kB活性は低下しM-CSFとRANKLで誘導した破骨細胞分化を阻害した。(2)遺伝子欠損マウス由来細胞を用いて、炎症性因子による破骨細胞の分化誘導の試み。NF-kBおよびAP-1のPTD融合タンパクが生成できなかったため、RANKL欠損マウス由来の破骨細胞前駆細胞に対するIL-1やLPSによる破骨細胞分化の検討は行わなかった。

AP-1 and NF-kB are essential for osteoclast differentiation. These factors play an important role in the development, proliferation and proliferation of cells in general. In this study, we developed a method for the fusion of PTD and the introduction of PTD into osteoclast cells. The following results have been obtained from the previous year's introduction and development of animal cells. (1) Construction of PTD fusion system for direct cell introduction. NF-kB and AP-1 were found in HEK293, an animal cell line. For example, if you want to determine the length of a file, you can use the file name. A study on the control of IKK complex by NF-kB activation and PTD fusion The IKK complex is essential for the formation of NBD domains and fusion, as well as for the function of bone marrow cells and peripheral blood cells. The decrease of NF-kB activity in the cells induced by M-CSF and RANKL prevents osteoclast differentiation. (2)The differentiation of osteoclasts induced by inflammatory factors NF-kB, AP-1 and PTD fusion protein production, RANKL deficiency, osteoclast precursor cells, IL-1, LPS, osteoclast differentiation and differentiation.

项目成果

期刊论文数量（12）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

Coordination of microtubules and the actin cytoskeleton is important in osteoclast function, but calcitonin selectively disrupts actin rings without affecting microtubule networks. Submitted for publication.

微管和肌动蛋白细胞骨架的协调对于破骨细胞的功能很重要，但降钙素选择性地破坏肌动蛋白环而不影响微管网络。

DOI：
发表时间：
2006
期刊：
Bone 39・(4)
影响因子：
0
作者：
Nakamichi Y et al.;Tsukiyama K et al.;Itoh S et al.;Yamamoto Y et al.;Udagawa N et al.;Okumura S et al.
通讯作者：
Okumura S et al.

The mechanism of coupling between bone resorption and bone formation.

骨吸收与骨形成的耦合机制。

DOI：
发表时间：
2006
期刊：
J Oral Biosciences 48・(3)
影响因子：
0
作者：
Nakamichi Y et al.;Tsukiyama K et al.;Itoh S et al.;Yamamoto Y et al.;Udagawa N et al.
通讯作者：
Udagawa N et al.

Osteoprotegerin reduces the serum level of receptor activator of NF-kappaB ligand derived from osteoblasts.

骨保护素可降低源自成骨细胞的 NF-κB 配体受体激活剂的血清水平。

DOI：
发表时间：
2007
期刊：
J Immunology 178(1)
影响因子：
0
作者：
Tokita;K;Inoue T.;Nakamichi Y et al.;Nakamichi Y et al.
通讯作者：
Nakamichi Y et al.

Osteoblasts provide a suitable microenvironment for the action of receptor activator of NF-κB ligand

成骨细胞为 NF-κB 配体受体激活剂的作用提供合适的微环境

DOI：
发表时间：
2006
期刊：
Endocrinology (In Press)
影响因子：
0
作者：
Ohno-Matsui K;Ichinose S;Nakahama K;Yoshida T;Kojima A;Mochizuki M;Morita I;Yamamoto Y.
通讯作者：
Yamamoto Y.

Gastric inhibitory polypeptide as an endogenous factor promoting new bone formation following food ingestion.

胃抑制多肽作为促进食物摄入后新骨形成的内源性因子。