ナノバブルによる新しい遺伝子導入法の開発と末梢循環障害の治療への応用
利用纳米气泡开发新的基因转移方法及其在治疗外周循环障碍中的应用
基本信息
- 批准号:19650133
- 负责人:
- 金额:$ 2.11万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for Exploratory Research
- 财政年份:2007
- 资助国家:日本
- 起止时间:2007 至 2008
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
我々は様々な低分子の安定ガスを用いてナノサイズのガス粒子およびGFP発現遺伝子を共に封入させ、さらにその周囲を様々な種類のリン脂質を用いて新規ハイブリッド型ナノバブルを試作した。これらの作成したハイブリッド型ナノバブルを用いてHEK293細胞(培養細胞)へのGFP発現遺伝子の導入効率を指標としGFP蛍光をFACSにて計測しその導入効率を定量化した。その結果、最終的に低分子の安定ガスとしてはC_3F_8ガス、またリン脂質としては(Distearoyl-Phosphocholine)-Distearoyl-Phosphoethanolamine-Poly Ethylene Glycolと(Distearoyl phosphatidylcholine)-Poly Ethylene Glycolを選び、ハイブリッド型ナノバブルを完成した。本ハイブリッド型ナノバブルは下記の優れた特徴を有した。1)リン脂質から成る脂質2重膜内の液相中に導入遺伝子が内封され、血液(体液)中でも導入遺伝子(cDNA)はエンドヌクレアーゼにて加水分解されない。2)ハイブリッド型ナノバブル内には液相が存在する。この液相中に水溶性のプラスミドDNAが溶解し、導入遺伝子は長期間、安定した状態でハイブリッド型ナノバブル内に保存される。3)ハイブリッド型ナノバブル内にはC_3F_8ガスから成るナノサイズの微小ガス粒子が含まれ、封入された導入遺伝子の近傍にてC_3F_8ガスによる有効かつ強力な衝撃波が生じるため、in vivo条件における遺伝子導入効率が極めて高い。4)ハイブリッド型ナノバブルはリン脂質2重膜にてコートされているため、ゼータ電位がほとんど無い。したがってマイナス電荷に帯電している細胞膜に対しても何ら影響なく接近し細胞内に導入することが可能である。すなわち、本ハイブリッド型ナノバブルはソノポレーション法による低侵襲性遺伝子導入の臨床応用に向け、今後、極めて有用なナノサイズレベルの遺伝子導入ツールに成りうると考えた。現在、本研究成果を基に特許の申請準備および原著論文の執筆中である。
We are trying to find a new way to reduce the number of low molecular weight particles and GFP molecules in the plasma. The efficiency of GFP expression in HEK293 cells (cultured cells) was quantified by FACS. The results show that the final stability of low molecular weight compounds is C_3F_8, C_3F_3F_8, C_3F_8, C_3F_3F_8, C_3F_3, C_3F_ This is the first time I've ever seen such a thing. 1) lipid synthesis; 2) introduction of gene into the liquid phase of the lipid membrane; 3) introduction of gene (cDNA) into the blood (body fluid); and 4) hydrolysis of gene. 2) There is no liquid phase in the liquid phase. The water-soluble DNA in the liquid phase is dissolved, and the introduced DNA is stored in a stable state for a long time. 3) In vivo conditions, the introduction efficiency of C_3F_8 particles is extremely high. 4) The The cell membrane has been affected by the electric charge. The clinical application of low-invasive gene introduction in the future is very useful for the development of gene introduction in the future. At present, the research results are based on the preparation of license application and the writing of the original paper.
项目成果
期刊论文数量(9)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Effects of flavoxate hydrochloride on voltage-dependent Ba2+ currents in human detrusor myocytes at different experimental temperatures
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- DOI:10.1007/s00210-007-0190-6
- 发表时间:2007
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:T. Tomoda;Hai‐Lei Zhu;K. Iwasa;M. Aishima;Atsushi Shibata;N. Seki;S. Naito;N. Teramoto
- 通讯作者:N. Teramoto
Molecular and biophyical properties of voltage-gated Na^+ currents inmurine vas deferens.
鼠输精管电压门控Na+电流的分子和生物物理学特性。
- DOI:
- 发表时间:2008
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:Zhu H;et al.
- 通讯作者:et al.
Transfection of Kir6.2 channel genes into vascular smooth muscle usingnanobubbles and ultrasound
使用纳米气泡和超声将 Kir6.2 通道基因转染至血管平滑肌
- DOI:
- 发表时间:2009
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:Iwasa K;et al.
- 通讯作者:et al.
Modulation of voltage-gated Na^+ currents in the murine vas deferens by veratridine
Veratridine 对小鼠输精管中电压门控 Na^ 电流的调节
- DOI:
- 发表时间:2008
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:Zhu H.;et. al.
- 通讯作者:et. al.
Actions of veratridine on tetrodotoxin‐sensitive voltage‐gated Na+ currents, NaV1.6, in murine vas deferens myocytes
- DOI:10.1111/j.1476-5381.2009.00301.x
- 发表时间:2009-08
- 期刊:
- 影响因子:7.3
- 作者:Hai‐Lei Zhu;R. Wassall;Maki Takai;H. Morinaga;M. Nomura;T. C. Cunnane;N. Teramoto
- 通讯作者:Hai‐Lei Zhu;R. Wassall;Maki Takai;H. Morinaga;M. Nomura;T. C. Cunnane;N. Teramoto
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