マウス輸精管平滑筋における電位依存性Naチャネルの分子実体の分子薬理学的解明

小鼠输精管平滑肌电压门控Na通道分子实体的分子药理学阐明

• 批准号: 07F07196
• 负责人: 寺本 憲功
• 金额: $ 1.41万
• 依托单位: Kyushu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2007
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2007 至 2008
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07F07196/
• 关键词: イオンチャネル; 遺伝子改変マウス; 平滑筋型ナトリウムチャネル

研究の目的:様々な平滑筋組織において活動電位が記録されtetrodotoxin投与にて選択的に消失する。しかし平滑筋型Na^+チャネルのチャネル特性やその分子実体に関しては未だ全く不明のままであった。様々な分子生物学的手法(RT-PCR法、in situハイブリダイゼーション法、免疫組織化学染色法等)および電気生理学的手法を用いてマウス輸精管平滑筋におけるNaVチャネルの主要構造を成すαサブユニット蛋白質はScn8aにてコードされるNaV1.6であると報告した(<Zhu HL>___- et al.Biophyscal Journal,94:3340-3351,2008)。本研究にてNaV1.6チャネル蛋白質をコードするScn8a遺伝子欠損マウス(NaV1.6^<-1->マウス)を用いて分子遺伝学のツールを用いて検証することを研究目的とした。研究実施内容:野生型マウス(NaV1.6^<+/+>マウス)における輸精管平滑筋細胞においてはNa^+電流は記録されたが、一方、NaV1.6^<-/->マウス輸精管平滑筋ではNa^+電流は全く記録されなかった(<Zhu HL>___- et al.British Journal of Pharmcology,in press,2009)。またNaV1.6^<+/+>マウスの輸精管平滑筋細胞に対してNa^+チャネルの選択的活性化薬であるveratridineを投与すると低濃度では活性化されたが、高濃度のveratridineではNa^+電流は抑制された。しかしveratridine投与にてtail電流および持続的なNa^+電流が新たに生じた。一方でNaV1.6^<+/+>マウス輸精管平滑筋細胞に対してveratridineを投与しても何も電流が生じなかった。以上の結果から平滑筋型NaVチャネルのαサブユニット蛋白質の分子実体はNaV1.6である可能性が強く示唆された。今後の研究計画:今後、NaV1.6^<-/->マウスとNaV1.6^<+/+>マウスを用い、両マウスにおける輸精管平滑筋の機能的な特性を比較することにて平滑筋型NaVチャネルに関する生理学的な役割を明らかにする計画である。

の study aim: others 々 な smooth muscle tissue に お い て activity potential が record さ れ tetrodotoxin cast with に て sentaku に disappear す る. The smooth fas-shaped Na^+チャネ チャネ チャネ チャネ チャネ characteristics やそ <s:1> molecular entity に relation て て not だ all く unknown ままであった ままであった Similar to 々な molecular biology techniques (RT-PCR method, in Situ ハ イ ブ リ ダ イ ゼ ー シ ョ ン method, immunohistochemical staining method, etc.) お よ び electric 気 physiology gimmick を with い て マ ウ ス vas deferens smooth muscle に お け る NaV チ ャ ネ ル の main structural を す alpha サ ブ ユ ニ ッ ト protein は Scn8a に て コ ー ド さ れ る NaV1.6 で あ る と report し た (< Zhu HL>___- et al.Biophyscal Journal,94:3340-3351,2008. This study に て NaV1.6 チ ャ ネ ル protein を コ ー ド す る Scn8a heritage 伝 son owe loss マ ウ ス (NaV1.6 ^ 1 - > < - マ ウ ス) を with い て molecular heritage 伝 learn の ツ ー ル を with い て 検 card す る こ と を research purpose と し た. Study: content be wild type マ ウ ス (NaV1.6 ^ < + / + > マ ウ ス) に お け る vas deferens smooth muscle cells に お い て は Na ^ + current は record さ れ た が, one party, NaV1.6 ^ < - / - > マ ウ ス vas deferens smooth muscle で は Na ^ + current は く record さ れ な か っ た (< Zhu > HL ___ - et al.British Journal of Pharmcology,in press,2009. ま た NaV1.6 ^ + / + < > マ ウ ス の vas deferens smooth muscle cells に し seaborne て Na ^ + チ ャ ネ ル の sentaku activeness of 薬 で あ る veratridine を cast with す る と low concentration で は activeness さ れ た が, high concentration の veratridine で は Na ^ + current は inhibit さ れ た. The <s:1> veratridine throws a にてtail current および holding a 続 なNa^+ current が generating たに じた. Party で NaV1.6 ^ < + / + > マ ウ ス vas deferens smooth muscle cells に し seaborne て veratridine を cast with し て も what も current が raw じ な か っ た. の above results か ら smooth muscle type NaV チ ャ ネ ル の alpha サ ブ ユ ニ ッ ト protein molecular be body の は NaV1.6 で あ る strong possibility が く in stopping さ れ た. の research projects in the future: the future and NaV1.6 ^ < - / - > マ ウ ス と NaV1.6 ^ + / + < > マ ウ ス を い, struck マ ウ ス に お け る vas deferens smooth muscle の functional properties of な are を す る こ と に て smooth muscle type NaV チ ャ ネ ル に masato す る physiology of cut を な service Ming ら か に す る project で あ る.

项目成果

Molecular and biophysical properties of voltage-gated Na+ channels in murine vas deferens.

小鼠输精管电压门控钠通道的分子和生物物理特性。

• DOI: 10.1529/biophysj.107.117192
• 发表时间: 2008
• 期刊: Biophysical journal
• 影响因子: 3.4
• 作者: Hai‐Lei Zhu;M. Aishima;H. Morinaga;R. Wassall;Atsushi Shibata;K. Iwasa;M. Nomura;M. Nagao;K. Sueishi;T. C. Cunnane;N. Teramoto
• 通讯作者: N. Teramoto

Modulation of voltage-gated Na^+ currents in the murine vas deferens by veratridine

Veratridine 对小鼠输精管中电压门控 Na^ 电流的调节

• 发表时间: 2008
• 作者: Zhu H.;et. al.
• 通讯作者: et. al.

Actions of veratridine on tetrodotoxin‐sensitive voltage‐gated Na+ currents, NaV1.6, in murine vas deferens myocytes

• DOI: 10.1111/j.1476-5381.2009.00301.x
• 发表时间: 2009-08
• 期刊: British Journal of Pharmacology
• 影响因子: 7.3
• 作者: Hai‐Lei Zhu;R. Wassall;Maki Takai;H. Morinaga;M. Nomura;T. C. Cunnane;N. Teramoto

Effects of flavoxate hydrochloride on voltage-dependent Ba2+ currents in human detrusor myocytes at different experimental temperatures

不同实验温度下盐酸黄酮酯对人逼尿肌细胞电压依赖性Ba2电流的影响

• DOI: 10.1007/s00210-007-0190-6
• 发表时间: 2007
• 期刊: Naunyn-Schmiedeberg's Archives of Pharmacology
• 作者: T. Tomoda;Hai‐Lei Zhu;K. Iwasa;M. Aishima;Atsushi Shibata;N. Seki;S. Naito;N. Teramoto
• 通讯作者: N. Teramoto

Actions of kurtoxin on tetrodotoxin-sensitive voltage-gated Na^+ currents, Na_V1.6, in murine vas deferens myocytes

库尔毒素对小鼠输精管肌细胞河豚毒素敏感电压门控 Na^ 电流 Na_V1.6 的作用

• 发表时间: 2009
• 期刊: Naunyn-Schmiedeberg's Archives of Pharmacology 379
• 作者: Zhu;et al.
• 通讯作者: et al.