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新しい核酸結合試薬の創製とDNA損傷のバイオイメージング

新型核酸结合试剂的创建和 DNA 损伤的生物成像

基本信息

批准号：
19655022
负责人：
西澤精一
金额：
$ 2.18万
依托单位：
Tohoku University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2007
资助国家：
日本
起止时间：
2007 至 2008
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究は, 蛍光性DNA結合試薬(リガンド)を利用するDNA損傷検出法の開発を目的とする。具体的には, DNA損傷修復過程の中間体として, あるいは塩基損傷に誘起される二重らせん構造の歪みにより生成する(疑似)脱塩基部位を, DNA損傷のマーカーとして「蛍光性リガンドにより検出すること」を試みる。平成20年度は, (1) チミン欠損を検出しうる蛍光性リガンドの開発を達成するとともに, (2) DNA損傷検出表面プラズモン共鳴(Surface Plasmon Resonance, SPR)センサーを開発した。(1) チミン欠損を標的とする場合, 対面塩基となるアデニンに対する結合リガンドを開発する必要があるが, アデニンとはワトソン・クリック型の塩基対として二点水素結合形成のみが可能であるため、アデニンに対する結合選択性と高親和力を発現させることが困難な状況にあった。ここでは, 種々の化合物をスクリーニングした結果, アデニンへの二点水素結合形成部位を有し, かつリガンドサイズを制御することで、アデニン(チミン欠損)検出リガンド(アロキサジン及びジメチルルマジン)を開発することに成功した。(2) 一方, 1, 8-ナフチリジン誘導体やプテリジン誘導体, 3, 5-ジアミノピラジン誘導体を新規合成し, これらを感応素子として利用することで, 高感度・高選択的なDNA損傷検出SPRセンサーを開発した。ここでは, 核酸塩基認識プローブ(DNA結合リガンド)を金基板チップ上に配列・固定化したセンサー(フローセル型)を開発したもので, グアニン欠損及びシトシン欠損, アデニン欠損を検出することが可能である。いずれのセンサーも, 標的欠損含有DNAに対してほぼ特異的なSPR応答を示し, また, 蛍光法と比較してより低濃度のDNA解析に適用可能である。

In this study, photoluminescent DNA combined with optical DNA was used to evaluate the purpose of the experiment. For specific information, the DNA system is used to repair the system in the process, and the system is used to cause the error of the system to generate a (suspected) off-the-base part of the system, and the DNA system is sensitive to the optical properties of the system. In the year of Pingcheng 20, (1) the photoluminescence system has been successfully opened, and (2) the DNA has shown that the Surface Plasmon Resonance, SPR) has a high performance. (1) if there is a lack of health care, the general information system should be combined with the necessary information on the basis of the operation of the system, and the two points of water in the health care system should be combined to form a combination of two points of water, which can be used to determine whether or not it is possible to cause severe illness. The results of the experiments show that there is a difference in the formation of the combination of two-point water and water, and that the system is used to control the temperature, the temperature and the temperature. (2) on the one hand, 1,8-octahedron, 1,8-octahedron, 3,5-octahedron, and so on. (2) on the one hand, on the one hand, 1,8-octahedron, 1,8-octahedron, and so on. (2) on the one hand, on the one hand, 1,8-octahedron, 1,8-octahedron, 3,5-octahedron, and so on. (2) on the one hand, on the one hand, 1,8-octahedron, 1,8-octahedron, 3,5-octahedron, and so on. (2) on the one hand, on the one hand, 1,8-octahedron, 1, On the base plate of nucleic acid (DNA), the gold substrate is equipped with an immobilization device (type I) to start the operating system, which is not valid and is not valid, and the system is not valid. The deficiency of the DNA data contains a special SPR that indicates that the optical method is lower than that of the DNA analysis.