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菌体外に多糖複合繊維を産生する酢酸菌ナノビルダーの創生

创建醋酸菌纳米结构，在细菌体外产生多糖复合纤维

基本信息

批准号：
19655083
负责人：
近藤哲男
金额：
$ 2.24万
依托单位：
Kyushu University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2007
资助国家：
日本
起止时间：
2007 至 2008
项目状态：
已结题

项目摘要

酢酸菌Acetobacter xylinumは、幅0.5-1.0μm、長さ2-10μmの好気性のグラム陰性細菌で、微生物セルロース(マイクロビアルセルロース)とよばれる幅約50nm、厚さ約10nmのセルロースナノファイバーを菌体外に産生することが知られている。酢酸菌は、セルロースナノファイバーの噴出エネルギーを駆動力としてファイバーの噴出方向とは反対方向へ走行する。研究代表者らは、この現象を制御、利用することで、パターンを有するセルロース三次元構造体を構築する研究を遂行してきた。三次元構造体の応用をさらに展開するため、酢酸菌に、免疫賦活作用を有することで知られる天然多糖である(1→3)-β-グルカンを産生させることができないかと考えた。そこで、本研究では遺伝子導入により酢酸菌に(1→3)-β-グルカンを生合成させることを目的とした。すなわち(1→3)-β-グルカンの合成酵素遺伝子を挿入したプラスミドベクターを酢酸菌へ導入して形質転換し、酢酸菌に(1→3)-β-グルカンを生合成させる。その前段階として、今回は酢酸菌への遺伝子導入の条件を設定するため、遺伝子挿入前のプラスミドベクターpTrc99A(PTA99)をエレクトロポレーション法により酢酸菌へ導入する検討を行った。その結果、AY201株へのプラスミドベクターの導入が可能であることがわかった。また、プラスミドベクター導入時の処理電圧とプラスミドベクターの導入によりアンピシリン耐性を獲得した酢酸菌数の指標となるアンピシリン添加寒天培地上での培養により形成されたコロニー数との関係から、処理電圧が低くなるほど酢酸菌へのプラスミドベクター導入の頻度が高くなることがわかった。これらのことから、AY201株を用いた遺伝子導入による形質転換への可能性が示唆され、セルロースナノファイバー以外の物質も同時に生合成するキメラ酢酸菌の創製へつながることが期待された。

碱性酸菌Acetobacter xylinum，0.5-1.0μm，直径2-10μm的好螺杆菌性假单胞菌属，微生物芽孢杆菌属（Acetobacter xylinum），直径50nm，厚10nm的假单胞菌属（Acetobacter xylinum），内生真菌属（Acetobacter xylinum）。酢酸菌は、セルロースナノファイバーの噴出エネルギーを駆動力としてファイバーの噴出方向とは反対方向へ走行する。研究代表者らは、この現象を制御、利用することで、パターンを有するセルロース三次元構造体を構築する研究を遂行してきた。三元复合体应用抗生素抑制生长激素、奥宁酸菌群、免疫激活作用有补体激活的已知天然多糖类（1→3）-β-羟维生素B1受体拮抗剂和免疫抑制剂。本研究以乳酸菌（1→3）-β-乳酸脱氢酶为诱导剂合成乳酸脱氢酶为目的，对乳酸脱氢酶进行了研究。将苦参碱（1 → 3）-β-甘草酸苷合成维生素B1子制备成苦参碱、苦参碱等。在此基础上，采用分段筛选法、回氨酸菌前体脂质体入组条件确定筛选法、脂质体入组前体脂质体制备法、pTrc99A（PTA99）筛选法等方法，对盐酸菌前体脂质体入组条件进行筛选。苹果，AY201株苹果树的变种，也可能是苹果树的变种。また、プラスミドベクター導入時の処理電圧とプラスミドベクターの導入によりアンピシリン耐性を獲得した酢酸菌数の指標となるアンピシリン添加寒天培地上での培養により形成されたコロニー数との関係から、処理電圧が低くなるほど酢酸菌へのプラスミドベクター導入の頻度が高くなることがわかった。酵母菌属真菌，AY201株利用酵母菌子进入酵母菌形的酵母菌群的可能性表示不确定性，酵母菌属真菌以及其他非生物物质共同生长合成的酵母菌属真菌。