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機能的植物ウイルスベクターを用いた家畜動物への新たな粘膜免疫法の開発

利用功能性植物病毒载体开发家畜粘膜免疫新方法

基本信息

批准号：
19658113
负责人：
林良博
金额：
$ 2.11万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2007
资助国家：
日本
起止时间：
2007 至 2008
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究は、植物ベクターを用いて効率的にワクチン抗原を可食植物に産生させ、家畜動物に粘膜免疫を行うというものである。本年度は、ワクチン抗原を導入した組換えタバコモザイクウイルスの作出、ナス科作物への導入、および植物において産生されたワクチン抗原を用いた、マウス及び家畜動物への感染防御試験を行うことを計画していた。はじめに、平成20年度に、平成19年度に予定していた、組換えタバコモザイクウイルスの作出を行った。ブタ回虫感染防御抗原であるAs16の遺伝子を、植物用に最適化したものを用い、ゲートウェイ法により、pTogJベクターに組み込んだ。改変As16遺伝子を導入したpTogJベクターを、in vitroで転写し、カーボランダム法により、Nicotiana tabacum CV. Xanthi nc葉に塗布した。組換えタバコモザイクウイルスの生成が、プラークの出現により、確認された。次に、得られたAs16産生組換えタバコモザイクウイルスを、Nicotiana benthamianaに感染させ、感染10日後に感染葉およびその上葉を回収し、導入As16 mRNAの転写をRT-PCRにより確認した。さらに、抗As16抗体を用いたウェスタンプロット解析により、16kDa程度のバンドが認められ、今回作出されたブタ回虫As16遺伝子導入組換えタバコモザイクウイルスの感染により、タバコにおいて組換えAs16蛋白が産生されたことが示唆された。今後、吸引法によるタバコへの効率的感染を行うとともに、他のナス科作物への感染及びAs16蛋白産生の確認を行い、本組換えウイルスを用いた感染防御抗原の産生およびその感染防御効果について検討する予定である。

This study focuses on the production of plant antigens and mucosal immunity in animals. This year, the introduction of antigen-related products into the plant, the introduction of antigen-related products into the plant, and the introduction of antigen-related products into the plant are planned. In 2009, the company was established in 2009, and in 2009, it was established in 2009. Antigens for the defense of insect infection are available as 16 genes, optimized for use in plants, and used in groups. Change As 16, Nicotiana tabacum CV. Xanthi nc leaf coating Create and confirm a list of the items in the list. Then, As16 gene expression was detected by RT-PCR after infection with Nicotiana benthamiana. In addition, anti-As16 antibody was used to analyze As16 protein. The 16 kDa protein was identified and the As16 protein was introduced into the system. In the future, the attraction method will be used to identify the infection rate of different crops and the production of As16 protein, and this group will be used to identify the production of infection defense antigens and the identification of infection defense effects.