新規薬物動態可視化解析法の開発

抗高脂血症薬であるpravastatinはコレステロール合成系の律速酵素であるHMG-CoA還元酵素を特異的に抑制し、コレステロールの生合成を抑制するスタチン系抗高脂血症薬であるが、そのトランスポーターに対する選択性についての詳細な検討は行われていない。そこでpravastatinの細胞内取込みを視覚的かつダイナミックに検討するため、pravastatinの蛍光標識体の合成と輸送解析を行った。Pravastatinのカルボキシル基にp-nitrophenol(PNP)を導入し、PNP基をNε-z-L-lysineと置換することで、pravastatinのカルボキシル基とlysineのα-アミノ基を結合させた。次いでカルボキシル基をメチルエステルに転換し、このNε-z-L-lysineを加水分解により脱保護し、Nε-z-L-lysine付加体に導いた。さらに、ε-アミノ基を利用してnitrobenzofurazan(NBD)を合成した。この合成した蛍光標識化合物の輸送実験を、薬物トランスポーターOATP1B1およびOATP1B3安定発現HEK293細胞を用いて行った。蛍光pravastatin取り込み実験よりPravastatin(Nε-NBD)-lysineはOATP1B1の基質とはならないがOATP1B3の基質となることが明らかとなった。

抗高脂血症薬であるpravastatinはコレステロール合成系の律速酵素であるHMG-CoA還元酵素を特異的に抑制し、コレステロールの生合成を抑制するスタチン系抗高脂血症薬であるが、そのトランスポーターに対する選択性についての詳細な検討は行われていない。そこでpravastatinの細胞内取込みを視覚的かつダイナミックに検討するため、pravastatinの蛍光標識体の合成と輸送解析を行った。Pravastatinのカルボキシル基にp-nitrophenol(PNP)を導入し、PNP基をNε-z-L-lysineと置換することで、pravastatinのカルボキシル基とlysineのα-アミノ基を結合させた。次いでカルボキシル基をメチルエステルに転換し、このNε-z-L-lysineを加水分解により脱保護し、Nε-z-L-lysine付加体に導いた。さらに、ε-アミノ基を利用してnitrobenzofurazan(NBD)を合成した。この合成した蛍光標識化合物の輸送実験を、薬物トランスポーターOATP1B1およびOATP1B3安定発現HEK293細胞を用いて行った。蛍光pravastatin取り込み実験よりPravastatin(Nε-NBD)-lysineはOATP1B1の基質とはならないがOATP1B3の基質となることが明らかとなった。