口腔胃相関からみた摂食早期の一酸化窒素介在型グレリン分泌機構

从口胃关系角度探讨喂养早期一氧化氮介导的ghrelin分泌机制

基本信息

批准号：
19659057
负责人：
鈴木秀和
金额：
$ 2.05万
依托单位：
Keio University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2007
资助国家：
日本
起止时间：
2007 至 2008
项目状态：
已结题

项目摘要

口腔由来の亜硝酸が、低pHの胃内で一酸化窒素(NO)を発生すると考えられるが、この胃腔内のNOのグレリン分泌への影響をみるために、Wistar系雄性ラット(24時間禁食)に、亜硝酸(0.1mmol/kg)を投与し、30分後に胃を摘出し、別系で16時間前にプロトンポンプ阻害薬(lansoprazole,30mg/kg, s. c.)を投与した群も検討した。亜硝酸投与により、血漿グレリン値は有意に上昇したが(p<0.05)、PPI投与で、この上昇は抑制された。胃内総グレリン量、組織標本中の単位面積当たりのグレリン陽性細胞数は、亜硝酸単独でも、PPI処置でも変化しなかった。以上より、口腔由来の亜硝酸が胃腔内の酸と反応し、胃からのグレリン分泌を促進することが示唆されたが、胃のA-like細胞の貯蔵量に影響するほどではないこともわかった。なお、酸分泌抑制で、グレリン分泌は抑制されることから、亜硝酸と酸が反応して発生するNOが口腔-胃相関による摂食調節に重要な役割を担っていると考えられた。一方、胃粘膜側の内因性のNOの役割を検討するために、神経型NO合成酵素nNOSの遺伝子を欠損したnNOSノックアウトマウスを用いて検討した。上部消化管では、このnNOSが、下部食道括約筋の弛緩、胃底部の弛緩による貯留能、幽門括約筋の弛緩を制御し、食道及び胃の運動機能に重要な役割を担っている。最近、様々な遺伝子の翻訳後修飾を制御するmicroRNAの存在が注目されてきたが、本研究ではnNOSノックアウトマウス胃におけるmicroRNA発現をmicroRNAマイクロアレイで解析し、miR-141は野生型マウスに比べ、ノックアウトマウスで8倍以上発現が上昇し、miR-491とmiR466は4倍以上上昇することがわかった。なお、ノックアウトマウスで2倍以上上昇したmicroRNAは27種、反対に半分以下にまで低下したmicroRNAは13種認めた。これらのmicroRNAがnNOS発現やnNOS由来NOによる胃機能を調節していることが考えられ、今後は個々のmicroRNAの反応や標的の検討をする必要があると考えられた。

据认为，来自口腔的亚硝酸盐在低pH值下在胃中产生一氧化二氮（NO），但是要看到胃腔中NO对生长素释放蛋白分泌的影响，我们还检查了一组对雄性Wistar Rats（24小时饮食）的亚硝酸盐（0.1 mmol/kg），该硝酸盐（0.1 mmol/kg）与NININE（0.1 kg）相关（0.1 k）。后来，16小时前在单独的系统中给予质子泵抑制剂（兰索拉唑，30 mg/kg，S.C。）。亚硝酸盐给药显着提高了血浆血浆素水平（P <0.05），但PPI给药抑制了这一增加。组织标本中每单位区域的总胃凝胶蛋白含量和生长素蛋白阳性细胞的数量均不单独使用或使用PPI处理而变化。从上面提出，来自口腔的亚硝酸盐与胃中的酸反应并促进胃中的生长素释放蛋白，但也发现这不会影响胃中储存的A-like细胞量。此外，由于抑制酸分泌的生长素素分泌抑制了酸性分泌，因此认为NO是由亚硝酸盐和酸的反应产生的，它在通过口腔冬季相关性喂养调节中起着重要作用。另一方面，为了研究内源性NO在胃粘膜侧的作用，使用NNOS敲除小鼠研究内源性NO合酶NNOS的作用。在胃肠道上部，NNOS控制着食管下括约肌的松弛，胃底的保留能力以及幽门括约肌的松弛，并在食管和胃的运动功能中起重要作用。最近，使用microRNA微阵列对各种基因的翻译后修饰的microRNA的存在一直引起人们的注意，但是在这项研究中，MiroRNA敲除小鼠的MicroRNA表达在NNOS敲除小鼠的胃中表达，并且发现MIR-141在敲除小鼠中比野生型小鼠更高8倍以上的miR-141比野生型小鼠高8倍。此外，发现27个microRNA在敲除小鼠中增加了两倍以上，而发现13个microRNA降低了不到一半。人们认为这些microRNA通过nnos衍生的NO调节了NNOS表达和胃功能，并且认为将来有必要研究单个microRNA的反应和靶标。