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体内時計に基づく死亡時刻推定法の確立ー分子生物学的手法で死者の体内時計を読むー

建立基于生物钟推算死亡时间的方法 - 利用分子生物学方法读取死者的生物钟 -

基本信息

批准号：
19659173
负责人：
木村章彦
金额：
$ 2.05万
依托单位：
Wakayama Medical University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2007
资助国家：
日本
起止时间：
2007 至 2008
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-19659173/
关键词：
死亡時刻推定法体内時計時計遺伝子 RT-PCR サーカディアンリズム mPer2 mBmal1 mPer1

项目摘要

平成19年度のマウスを用いた体内時計に基づく死亡時刻推定法に関する基礎的研究において、死体臓器から抽出したRNAを試料として正確に体内時計を読むことが出来ることを示した。平成20年度は、教室での剖検例に本法を適用し、遺体の腎から抽出したRNAを試料として体内時計を読むことが可能かどうか検討した。死亡時刻が明らかで、死後2日以内の遺体からの腎を試料として、2つの時計遺伝子、Per2とBmal1の発現比(Per2/Bmal1)に基づく方法により正確に体内時計を読むことが可能であった。また、剖検例の心臓血あるいは末梢血を試料としても同様の方法で体内時計を読むことが可能であり、腎の体内時計とは位相がずれていることから、腎と血液の両方を試料とすることでより正確な死亡時刻の推定が可能と思われた。剖検例の死因、性別および年齢の体内時計に及ぼす影響について検討を行ったが、これらの要因はいずれも検出される体内時計に大きな影響を及ぼさないことが示された。さらに、本年はreal-time PCRを用いた検討も行い、通常のPCR、アガロースゲル電気泳動およびデンシトメトリーを組み合わせた方法と比較を行った。real-time PCRによる方法は、通常のPCRによる方法に比較してより時計遺伝子の振動の振幅を大きく検出することが可能であり、且つより短時間で測定が終了することが明らかとなった。以上のことから、「分子生物学的手法で死者の体内時計を読む」という本研究の所期の目的はほぼ達成されたと考える。今後は研究結果を論文発表するとともに実用に向けたデータの蓄積に努める予定である。

In 2019, the use of in vivo chronology, the estimation of the time of death, the basic research, the extraction of RNA, and the correct in vivo chronology were shown. This method is applicable to the analysis of human kidney in the 20th year of Heisei. The time of death, the body within 2 days after death, the kidney sample, the 2-day timer, the Per2/Bmal 1 ratio, the basic method, the correct internal timer, and the possibility. The method for determining the time of death is to determine the time of death. The cause of death, sex and age of the patient are discussed in detail. This year, real-time PCR is used in the middle of the study, the general PCR, the electric mobility and the combination of methods. Real-time PCR method is different from ordinary PCR method. It is possible to measure the amplitude of vibration of real-time PCR in a short time. The aim of this study is to achieve the goal of "molecular biology approach to the internal chronology of the dead." The future results of the study are presented in the paper.