体内時計に基づく死亡時刻推定法の確立ー分子生物学的手法で死者の体内時計を読むー

建立基于生物钟推算死亡时间的方法 - 利用分子生物学方法读取死者的生物钟 -

• 批准号: 19659173
• 负责人: 木村 章彦
• 金额: $ 2.05万
• 依托单位: Wakayama Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2007
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2007 至 2008
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-19659173/
• 关键词: 死亡時刻推定法; 体内時計; 時計遺伝子; RT-PCR; サーカディアンリズム; mPer2; mBmal1; mPer1

平成19年度のマウスを用いた体内時計に基づく死亡時刻推定法に関する基礎的研究において、死体臓器から抽出したRNAを試料として正確に体内時計を読むことが出来ることを示した。平成20年度は、教室での剖検例に本法を適用し、遺体の腎から抽出したRNAを試料として体内時計を読むことが可能かどうか検討した。死亡時刻が明らかで、死後2日以内の遺体からの腎を試料として、2つの時計遺伝子、Per2とBmal1の発現比(Per2/Bmal1)に基づく方法により正確に体内時計を読むことが可能であった。また、剖検例の心臓血あるいは末梢血を試料としても同様の方法で体内時計を読むことが可能であり、腎の体内時計とは位相がずれていることから、腎と血液の両方を試料とすることでより正確な死亡時刻の推定が可能と思われた。剖検例の死因、性別および年齢の体内時計に及ぼす影響について検討を行ったが、これらの要因はいずれも検出される体内時計に大きな影響を及ぼさないことが示された。さらに、本年はreal-time PCRを用いた検討も行い、通常のPCR、アガロースゲル電気泳動およびデンシトメトリーを組み合わせた方法と比較を行った。real-time PCRによる方法は、通常のPCRによる方法に比較してより時計遺伝子の振動の振幅を大きく検出することが可能であり、且つより短時間で測定が終了することが明らかとなった。以上のことから、「分子生物学的手法で死者の体内時計を読む」という本研究の所期の目的はほぼ達成されたと考える。今後は研究結果を論文発表するとともに実用に向けたデータの蓄積に努める予定である。

Pp.47-53 19th annual の マ ウ ス を with い た inner clock に base づ く death moment estimate に masato す る based research に お い て, carcass viscera か ら spare し た RNA を sample と し て に right inner clock を 読 む こ と が out る こ と を shown し た. 20 year は pp.47-53, classroom で の cutting 検 example に を in this law shall be governed by し, body の kidney か ら spare し た RNA を sample と し て inner clock を 読 む こ と が may か ど う か beg し 検 た. Death moment が Ming ら か で, within 2 days from the date of death remains の か ら の renal を sample と し て, 2 つ の chronometer heritage 伝, Per2 と Bmal1 の 発 now than (Per2 / Bmal1) に づ く method に よ り に right inner clock を 読 む こ と が may で あ っ た. ま た 検 example, 3-d の is crucial heart blood あ る い を は peripheral blood sample と し て も with others の way で inner clock を 読 む こ と が may で あ り, kidney の inner clock と は phase が ず れ て い る こ と か ら, renal blood の と struck party を sample と す る こ と で よ り な death right moment の presumption が may と think わ れ た. Cutting の 検 cases the cause of death and gender お よ び years 齢 の inner clock に and ぼ す influence に つ い て 検 line for を っ た が, こ れ ら の by は い ず れ も 検 out さ れ る inner clock に big き な influence を and ぼ さ な い こ と が shown さ れ た. さ ら に, this year は real - time PCR を with い た 検 line for も い, usually の PCR, ア ガ ロ ー ス ゲ ル electric 気 swimming お よ び デ ン シ ト メ ト リ ー を group み close わ せ た と comparative を line っ た. Real - time PCR に よ は る method, usually の PCR に よ る に comparative し て よ り chronometer heritage 伝 son の large vibration amplitude を の き く 検 out す る こ と が may で あ り and つ よ り で short time determination が end す る こ と が Ming ら か と な っ た. Above の こ と か ら, "molecular biology methods で dead の inner clock を 読 む" と い う period の purposes in this study are の は ほ ぼ reached さ れ た と exam え る. は research results in the future を paper 発 table す る と と も に be use に to け た デ ー タ の accumulation に Mr め る designated で あ る.

项目成果

時計遺伝子発現に基づく死亡時刻推定法-第1報

基于时钟基因表达的死亡时间估计方法 - 第一份报告

• 发表时间: 2007
• 作者: 工藤 恵子;他;林 敬人
• 通讯作者: 林 敬人