ABO式血液型抗原の臓器特異エピトープに関する研究

ABO血型抗原器官特异性表位的研究

• 批准号: 08670499
• 负责人: 木村 章彦
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: Wakayama Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-08670499/
• 关键词: ABO式血液型; 臓器特異性; モノクローナル抗体; 糖鎖

各血液型の唾液から血液型活性ムチンを分画精製し、それらを抗原としてマウスに免疫し、モノクローナル抗体を作製した。その際、対応する血液型の赤血球および唾液を抗原としてELISAを行い、唾液のみと反応する抗ABO式血液型抗体を得ることに成功した。得られた抗体A3(抗A抗体)、B4(抗B抗体)は、ELISA、イムノブロッティング、免疫組織染色いずれにおいても、唾液、精液、膣液、胃液中の血液型物質と型特異的に反応したが、赤血球膜上の血液型抗原とは凝集反応を含めた上記の方法において全く反応せず、体液特異的抗ABO式血液型抗体であることが判明した。これらの抗体が認識する、体液特異的ABHエピトープの構造を明かにする目的で、A3およびB4を用いたアフィニティークロマトを行い、それぞれの抗体に反応する糖鎖を有する唾液ムチンを分画した。アフィニティークロマトで得られた画分について、アルカリ処理によるβ脱離及びヒドラジン分解により糖鎖の切り出しを行い、高速液体クロマトグラフィーによりオリゴ糖のプロフィールを明かにした。しかし、複数のオリゴ糖からA3及びB4が認識するエピトープを担うオリゴ糖の選択には現在のところ成功していない。今後、オリゴ糖を再度アフィニティークロマトにより分画した後、高速液体クロマトグラフィーにより分取精製し、構造を明かにする予定であり、本研究の目的は遠からず達成されると考える。

The saliva of each blood type is divided into three parts: purification, immunization and antibody production. In addition, the anti-ABO blood type antibody was successfully detected by ELISA. Antibodies A3(anti-A antibody) and B4(anti-B antibody) were detected by ELISA, immune-tissue staining, type-specific anti-ABO antibodies in saliva, semen, urine, and gastric juice, and hemagglutination anti-ABO antibodies in red blood cells. The antibody is recognized by the body fluid, and the structure of the antibody is clearly defined. The antibody is recognized by the body fluid. The antibody is identified by the saliva. In addition to the above, it is also possible to obtain high-speed liquid crystal display, such as high-speed liquid crystal display, and high-speed liquid crystal display. For example, if you want to know more about A3 and B4, you can choose between A3 and B4. From now on, the goal of this study is to achieve the goal of high-speed liquid separation and purification.