C・elegans後期発生における遺伝子機能ネットワ-クの解明

点击翻译按钮获取中文摘要

1)形態異常幼虫致死変異株を、平成1年度はEMS処理したN2株より9株分離したが、本年度はさらにEMS処理したN2株より6株、ミュ-テ-タ-株より9株分離し、合計24株になった。2)形態異常には、コイル状、4つ折り、2つ折りで体が短い、咽頭の周囲が太い、皮膚が凹凸、脱皮不能、体壁と腸の間に隙間、などがあった。微分干渉顕微鏡および蛍光顕微鏡(DAPI染色)により、孵化直後に体の中央部にある約120個の細胞核を調べたが、数が大きく異なるものはないが、位置がずれているものがあった。また、ロ-ダミン・ファロイジンでアクチン繊維を染色したところ、繊維の向きが異常なものが2株あった。3)I、II、III、IV、V、X染色体に位置する変異の数は、それぞれ2、8、4、2、7、1個であった。染色体上での位置も決めた。24の変異株の内、同じ遺伝子のものが2組あった。既知の遺伝子の変異が4株あったが、他の多くの株は、未知の遺伝子または既知でも表現型が未解析のlet遺伝子に属するらしい。4)新たな耐性変異を分離するよりも、既に分離したフッ素イオン耐性変異株を解析することにした。5)Tc1挿入株よりflrー1遺伝子をクロ-ニングした。flrー3や1)の変異株のクロ-ニングも準備中である。6)マイクロインジェクションの実験は予定が遅れ、現在、装置の設定・DNAの調整・練習を行っている。7)flr遺伝子間の二、三重変異株を構築したところ、flrー2がflrー1やflrー3の『成長速度が遅い』という表現型を抑制することがわかった(フッ素イオン耐性は抑制しない)。8)モザイクは1)の変異株のいくつかについて検討中である。