ミトコンドリア脳筋症におけるDNAの転写ならびに翻訳段階の解析

线粒体脑肌病 DNA 转录和翻译阶段分析

• 批准号: 03454241
• 负责人: 依藤 史郎
• 金额: $ 2.56万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (B)
• 财政年份: 1991
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1991 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-03454241/
• 关键词: ミトコンドリア脳筋症; ミトコンドリアDNA; ミトコンドリアDNA欠失; KearnsーSayre症候群; DNA反復配列; RNAーPCR法

本年度の研究は当初の計画に従い、多数保存中のミトコンドリア脳筋症の生検骨格筋のミトコンドリア異常の有無をスクリ-ニングした。ミトコンドリアDNAのSouthern blot解析を行いその中からKearnsーSayre症候群5例にそれぞれ3.4,5.6,5.5,9.2,5.0kbのlarge scale deletionを有する例をまず見いだした。これらの5症例の欠失部分のDNAをシ-クエンスし欠失断片の塩基配列を決定した。その結果3例は5、10、13bpの反復配列を見いだされそれらの部位はいずれもミトコンドリアDNA複製の際に一本鎖DNAのまましばらく留まる部分に相当していた。一方残りの2例 は反復配列を見いだすことはできず欠失部分はH鎖またはL鎖の複製開始点に近接していた。以上の結果によりミトコンドリアDNAが欠失する機序は少なくとも2つあることが明らかになった。次にlarge scale deletionを認めなかった2例のKearnsーSayre症候群の骨格筋ミトコンドリアDNAをPCRで増幅したところ欠失を有するミトコンドリアが存在している事が明らかになった。その欠失断端の塩基配列をシ-クエンスしたところ2例とも反復配列を有する欠失であった。そこで生検骨格筋を用いてRNAーPCR法にてRNAの分析を行った。RNAは不安定でありさらに分析材料の保存条件もRNAの保存状態に関係してくるため現時点では分析条件の設定をしている段階である。予報的ではあるが欠失部分は転写されていると考えられる結果を得ているが尚検討が必要な段階である。今後より詳細な分析を予定している。

This year's research is based on the original plan, and most of the current projects are still being preserved. Symptoms are caused by abnormality of the bones and tendons.ミトコンドリアDNA Southern blot analysisを行いその中からKearnsーSayre syndrome 5 casesにそれぞれ3.4,5.6,5.5,9.2,5.0kbのlarge scale deletionを有する examplesをまず见いだした.これらの5 cases are based on the DNA sequence that is missing part of the DNA - the missing fragments are determined by the base alignment.そのResults 3 casesは5,10,13bpのrepeated arrangementを见いだされそれらのpartsはいずれもミトコンドリアDNA copy の记に本 lockDNA のまましばらくstay まるPart にequivalent していた. 2 examples of one party's remaining parts は Repeated arrangement を见いだすことはできずThe missing part は H lock ま た は L lock の copy start point に し て い た. The result of the above is that the DNA is missing and the machine sequence is the same. Large scale deletionをcognitionめなかった2 casesのKearnsーSayre syndromeのbone grid tendonミトコンドリアDNAをPCR increases the width of the DNA and causes the loss of the DNA. Two cases of その无码 due to the broken end of the base arrangement をシ-クエンスしたところとも Repeated arrangement を有する owed to lose the であった. The raw material was analyzed using the RNA-PCR method. RNA is unstable and the storage conditions of the analysis material are the same. The storage status of the RNA is the relationship between the current point and the analysis conditions. The missing part of the report is the missing part, and the result is the necessary step. In the future, detailed analysis will be carried out and it will be decided.

项目成果

DiMauro S.Sato T eds.: "Progress in Neuropathology,vol.7 Mitochondrial Encephalomyopathies." Raven Press,New York,258 (1991)

DiMauro S.Sato T eds.：“神经病理学进展，第 7 卷线粒体脑肌病”。

Kageyama Y,: "An autopsy case of mitochondrial encephalomyopathy with prominent degeneration in olivoーpontoーcerebellar system." Acta Neuropathol 83:99ー103,1991.83. 99-103 (1991)

Kageyama Y，：“橄榄脑桥小脑系统显着变性的线粒体脑肌病尸检病例”Acta Neuropathol 83：99-103，1991.83（1991）。

Soga H,: "Molecular analysis of mitochondrial DNA in KearnsーSayre syndrome." Human Genetics.

Soga H，：“卡恩斯-塞尔综合征中线粒体 DNA 的分子分析。”

Abe K,: "Marked reduction in CSF lactate and pyruvate levels after CoQ therapy in a patient with mitochondrial myopathy,encephalopathy,lactic acidosis and strokeーlike episodes(MELAS)" Acta Neurol Scand 1991:83:356ー359.83. 356-359 (1991)

Abe K，：“患有线粒体肌病、脑病、乳酸性酸中毒和中风样发作 (MELAS) 的患者接受 CoQ 治疗后，脑脊液乳酸和丙酮酸水平显着降低” Acta Neurol Scand 1991：83：356-359.83。 (1991)

曽我 文久: "KearnsーSayre症候群におけるミトコンドリアDNAの解析" 大阪大学医学雑誌. 43. 143-151 (1991)

Fumihisa Soga：“Kearns-Sayre 综合征的线粒体 DNA 分析”大阪大学医学杂志 43. 143-151 (1991)。