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コラーゲン特異的ストレス蛋白質HSP47の発現調節

胶原蛋白特异性应激蛋白 HSP47 表达的调节

基本信息

批准号：
04833014
负责人：
平芳一法
金额：
$ 1.41万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1992
资助国家：
日本
起止时间：
1992 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-04833014/
关键词：
ストレス蛋白質コラーゲン分子シャペロン

项目摘要

コラーゲン特異的分子シャペロンHSP47の発現調節機構を解明するため、ニワトリおよびマウスのゲノム遺伝子のクローニングを行い、その解析を行った。マウスHSP47のゲノム遺伝子構造に関しては、Gene誌に発表を行った。この遺伝子は、6つのイントロンと5つのエクソンからなる全長約7.5kbの遺伝子である。転写制御領域に関しては、いくつかの特徴的な配列がみられた。この領域の解析にあたっては、二つの観点 i)コラーゲンの発現量に呼応した発現を制御する領域と、ii)ストレスによる誘導を制御する領域に分けてその同定及び解析を進めている。熱ショックによる遺伝子の発現は、転写開始点の上流約100bpに存在する熱ショックエレメントによって制御されていることをすでに明らかにした。本研究の主要なテーマであるコラーゲンの発現に呼応した発現を制御する領域の検索は、現在その解析を進行中である。転写開始点の上流3.0kbにおよぶ領域をレポーター遺伝子であるCATの上流につなぎBalb/c 3T3細胞に導入後そのCAT活性を測定した。ストレスによる誘導に関しては、上述のように熱ショックエレメントが重要な働きをしている。定常的な発現に関しては、その検出が出来ず、欠損変異の導入により転写調節領域の解析を進めている。定常的な発現に関しては、-150から3'領域をもつプラスミドにわずかの活性が観察されるのみであった。定常レベルでの発現が検出できない理由については、1)細胞がすでにHSP47をfullに発現しており、あらたな発現の誘導に必要な因子が補給されない、2)転写調節領域がさらに上流あるいは、第一イントロンに存在するなどが原因として考えられる。このような点を考慮にいれ、定常状態での発現を検出できるよう、遺伝子導入細胞の検索、さらに上流あるいは、第一イントロンを含んだプラスミドの構築を行い、定常状態での発現を同定しうるシステムの構築をおこなっているところである。

The regulatory mechanism of the current regulatory mechanism of コラーゲン's specific molecule シャペロンHSP47 is revealedワトリおよびマウスのゲノム伝子のクローニングを行い、そのanalytic を行った. The structure of the HSP47's remaining parts is the structure of the sub-structure, and the character of the gene is the same. The total length of この伝子は and 6つのイントロンと5つのエクソンからなる is approximately 7.5kb. The 転WRITING controls the domain's に关しては and いくつかの特徴's な平行がみられた.この区のanalyticsにあたっては、二つのViewpoint i) コラーゲンの発成quantity にHU応した発 appear をcontrol する区と, ii) ストThe field of レスによるinducing をcontrol する is divided into けてその同定 and びanalytic を进めている.热ショックによる缝子の発appearは、転WRITING The starting point is about 100bp upstream and exists.る热ショックエレメントによってされていることをすでに明らかにした. The main focus of this study is the control of the control field and the current analysis is in progress. The activity of CAT was measured after the introduction of 3T3 cells into Balb/c 3T3 cells.ストレスによるinducing に关しては, the above のように热ショックエレメントがimportant な働きをしている. The constant な発appears and closes the しては, the その検出が出ず, and the lack of loss and difference のINTRODUCTION により転writes the ANALYSIS of the adjustment field and enters the めている. The constant な発appears and closes the しては, and the -150 から3'field をもつプラスミドにわずかのactive が看されるのみであった. The reason for the steady progress of the regular routine, 1) cellすでにHSP47をfullに発appearしており、あらたな発appearのinducingにNecessary factor がsupply されない, 2) 転WRITING REGULATION FIELDS がさらに上上あThe reason for the existence of るいは, the first イントロンにするなどがとして卡えられる.このようなPoint をConsider にいれ, steadiness state での発appear を検出できるよう, 缝子 introduces the cell の検SO, さらに上流あるいは, 一イントロンを与んだプラスミドのconstruct を行い、steady state での発appearを同定しうるシステムのconstruct をおこなっているところである.