植物土壌病害の病原菌・寄主間相互関係の解析

植物土壤病害病原菌与寄主相互作用分析

• 批准号: 05660060
• 负责人: 有江 力
• 金额: $ 1.41万
• 依托单位: The Institute of Physical and Chemical Research
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-05660060/
• 关键词: Fusarium; ペクチン質分解酵素; アイソザイム; 等電点電気泳動; 抗体

土壌病原菌の中でも非常に甚大な被害を及ぼしているフザリウム病菌を対象として試験を行なった。1.トマト萎ちょう病菌(Fusarium oxysporum f.sp.lycopersici)より、現在市場性の高い品種、桃太郎に強い病原性を示す株について、病原菌-寄主植物間の相互関係を調査した。トマト60余品種と国際標準病原菌株等を用い、接種試験により遺伝的解析を行なった。この結果、現在我が国で問題になっている病原菌は、抵抗性遺伝子IOTAを無効化するレース2であると判断された。また、この菌は果実が堅い完熟系の品種に強い病原性を示すことが多く、病原菌一寄主植物間の相互関係にペクチン等の関与が推測された。2.F.oxysporumの20余の分化型を中心に、G6PDHを初めとする15余の一般的酵素およびペクチン質分解酵素などについて、等電点電気泳動によりアイソザイム解析を行なった。この結果、一般的酵素については、菌株間等でアイソザイムパターンに差が見られたが、病原性とリンクするものは見いだされなかった。ペクチン質分解酵素については、殆どの菌株でpI値7.3、7.0、6.7、6.1の共通のアイソザイムを持っていることが判明した。3.F.oxysporum f.sp.Iycopersiciのペクチン質分解酵素産生条件について検討を加えた。基礎培地にトマト植物体、シトラスペクチン、ポリガラクツロン酸を添加すると本酵素が誘導されたが、サッカロース、マンノース等では誘導されなかった。また、本酵素の最適pHは4.5前後であった。4.ペクチン添加培地培養上清から硫安塩析、G25カラム、C50カラムによるイオン交換、G75カラムによるゲル濾過で本酵素を粗精製した。SDS-PAGEの結果分子量約4.5Kであった。5.粗精製酵素を用いてマウスを免疫し、モノクローナル抗体を作製中である。得られる予定の抗体を用いて植物組織内での酵素分布等を調査する予定である。6.トマト萎ちょう病菌より抽出したmRNAよりcDNAを得た。既報のバクテリア等のペクチン分解のシークエンスを参考にプライマーを作製した。このプライマーを用い、cDNAをテンプレートとしてプローブを作製、フザリウムのペクチン質分解酵素遺伝子を探索している。今後は、この遺伝子の発現について調査を行なう予定である。7.すでに作成したフザリウム属菌と特異的に反応するモノクローナル抗体API9-2を用いてフザリウム菌の表面の解析を行なった。この結果、抗体の反応部位が菌糸表面のマンナンを多く含む多糖であることが判明した。

The pathogen of soil is very important for killing and killing. 1. To investigate the relationship between Fusarium oxysporum f. sp. lycopersici and host plants. More than 60 strains of international standard pathogens were used, inoculated and analyzed. The result is that we now have a problem with pathogens and resistance to IOTA. The relationship between pathogenicity and host plants was analyzed. 2. F. oxysporum has more than 20 differentiation centers, G6PDH, and more than 15 general enzymes. As a result, common enzymes, strains, etc., can be found in different ways, and pathogenic enzymes can be found in different ways The pI values of 7.3, 7.0, 6.7 and 6.1 of the strains isolated from the same strain were determined. 3. F. oxysporum f.sp.Iycopersici is selected for the production of proteolytic enzymes. The basic culture of plant, plant, plant The optimum pH for this enzyme is around 4.5. 4. The supernatant of culture medium was purified by sulfur analysis, G25 culture medium, C50 culture medium exchange, G75 culture medium filtration and crude purification of the enzyme. SDS-PAGE results showed that the molecular weight was about 4.5K. 5. The crude enzyme is used in the preparation of antibodies. To investigate the distribution of enzymes in plant tissues by using predetermined antibodies 6. The pathogen was isolated from mRNA and cDNA Both the press release and the press release are available for reference. The use of cDNA in the production of protein, protein and protein decomposition enzyme gene In the future, the investigation will be carried out in the future. 7. To prepare the surface analysis of the genus bacteria and the specific antibody API9-2 As a result, the antibody antibody was detected on the surface of the bacteria.

项目成果

有江 力: "Fusarium oxysporum f.sp.lycopersici 880621a-1の産生するpdygala-cturouaseについて" 日植病報. 59. 734- (1993)

Tsutomu Arie：“关于尖孢镰刀菌 f.sp.lycopersici 880621a-1 产生的 pdygala-cturouase”，Nippon Ichihoho 59. 734- (1993)。

Tsutomu Arie: "Microorganisms in rhizosphere,plant pathogens and biocontrd agents" RIKEN Review. 3. 27-28 (1993)

Tsutomu Arie：“根际微生物、植物病原体和生物控制剂”RIKEN Review。