低分子GTP-結合蛋白質RAB群の細胞内膜輸送における役割

小 GTP 结合蛋白 RAB 基团在细胞内膜转运中的作用

• 批准号: 05670017
• 负责人: 和佐野 公二郎
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Kyushu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-05670017/
• 关键词: RAB蛋白; 細胞内膜輸送; 肺胞2型細胞; 肺胞表面活性物質

本研究目的のRAB蛋白群中、現在までにRAB1、6と7の3種に対する特異抗体の作成に成功した。この内Late endosomeに特異的であると考えられているRAB7抗体と抗lamp1抗体(LysosomeまたはLate endosomeに特異的)を用い、ラット肺胞2型細胞内の層板小体(以下LBsと略す)の限界膜の性質について検索した。LBs限界膜は両抗体に対し染色された。この所見は、従来、肺胞表面活性物質の分泌顆粒であると考えられていたLBsが、実は同時にLate endosomeつまり細胞が外界から取り込んだ物質の処理をする細胞小器官である事が判明した。すなわち、肺胞2型細胞は、自分が分泌した活性物質を取り込み、次いでこれを自己の再処理工場へと送り込む、いわゆるリサイクリングを行っている可能性が強く示唆された。この所見は肺胞2型細胞が、活性物質に対する特異受容体をもち、分泌された活性物質中の燐脂質の大部分を再回収しているとの生理学的研究結果とも良く符合し、かつこの知見に良い形態的基盤を提供するものである。今後、Endosomeに特異的RAB蛋白抗体、とくにEndosomeからGolgi装置への膜還流に関与していると考えられているRAB9蛋白に対する抗体、またはEndosomeから表面膜への膜還流に関与するRAB4蛋白に対する抗体の作成に努力してゆく。また、LBsの前駆体と考えられているMultivesicular bodies(この細胞小器官は肺胞2型細胞に多く見られLBs形成に関与するとみなされている)の膜の性質にも同時に留意しつつ、肺胞2型細胞内での膜の流れを明らかにすべく研究を続行、発展させる。

In this study, specific antibodies against RAB1, 6 and 7 were successfully prepared. The LABs (hereinafter abbreviated as LBs) and the properties of the limiting membrane in lung cell type 2 cells are detected by RAB7 antibody and anti-lamp 1 antibody (Lysosome and Late endosome-specific). LBs limit antibody staining The results showed that the secretion of surfactant from lung cells and LBs could not be detected, and the process of surfactant secretion from lung cells and LBs could not be detected at the same time. The possibility of cell type 2 cells secreting active substances from their own cells to their own reprocessing plants is strongly demonstrated. The results of physiological studies on the specific receptor for active substances in lung cell type 2 cells are in good agreement with those of physiological studies on phospholipids in active substances secreted by lung cell type 2 cells. In the future, efforts will be made to produce antibodies specific for the RAB protein in the Endosome, antibodies against the RAB9 protein that are involved in membrane reflux from the Endosome to the Golgi device, and antibodies against the RAB4 protein that are involved in membrane reflux from the surface membrane of the Endosome. The membrane properties of the precursors of LBs and LBs were studied. Meanwhile, the membrane flow in lung type 2 cells was also studied.

项目成果

K.Wasano,Y.Hirakawa: "Lamellar bodies of rat alveolar type 2 cells have late endosomal markev proteins on their limiting membranes" Histochemistry. (accepted).

K.Wasano，Y.Hirakawa：“大鼠肺泡 2 型细胞的层状体在其限制膜上具有晚期内体 Markev 蛋白”组织化学。