細胞内膜輸送システムに関与する新しい分子の細胞生物学的研究

细胞内膜转运系统新分子的细胞生物学研究

• 批准号: 16770144
• 负责人: 中村 信大
• 金额: $ 2.18万
• 依托单位: Tokyo Institute of Technology
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2004 至 2005
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-16770144/
• 关键词: エンドゾーム; 細胞内膜輸送; RINGフィンガー; ユビキチン; トランスゴルジ網; SNARE; PDZドメイン; メンブレントラフィッキング; 膜タンパク質; 膜輸送; RNA干渉; ゴルジ装置

前年度の研究では,膜二回貫通型RINGフィンガータンパク質MARCH-II (membrane-associated RING-CH finger protein)を同定し,これが膜輸送・膜融合の調節因子であるSNAREタンパク質syntaxin6と直接結合することを明らかにした。平成17年度の研究では,さらにMARCH-IIに相同性の高い分子としてMARCH-IIIを同定し,その機能解析から以下に述べるようにMARCH-IIIがMARCH-IIに非常に良く似た性質をもつことを明らかにした。(1)ラットMARCH-IIIがユビキタスな組織発現分布を示すことを明らかにした。(2)培養細胞COS7細胞にMARCH-IIIを発現させたところエンドゾームに一部局在することを認めた。(3)免疫沈降法によりMARCH-IIIがsyntaxin6と複合体を形成することを明らかにした。(4)MARCH-IIIの過剰発現により,トランスフェリンの取り込み阻害が生じ,細胞表面とトランスゴルジ網(TGN)を循環することが知られているTGN46がMARCH-IIIの存在する膜構造に集まることを認めた。(5)このような阻害効果は,MARCH-IIIのRING fingerドメインやPDZ結合モチーフを欠失した変異体を発現させた際には観察されなかった。(6),MARCH-IIおよびMARCH-IIIのRING fingerドメインはE3ユビキチンリガーゼ活性を有することを明らかにした。以上の結果からMARCH-IIIがエンドゾームにおける膜輸送に関与することを示唆することができた。

In the previous year's research, the membrane-associated RING-II (membrane-associated RING-CH finger protein) was identified as a regulatory factor for membrane transport and membrane fusion. In the research of Heisei 17, MARCH-II and MARCH-III have the same high molecular identity, and the function analysis is described below. (1)MARCH-III is the first to show the distribution of tissue. (2)Culture of COS7 cells MARCH-III cell development (3)MARCH-III syntaxin6 complex (4)MARCH-III's appearance in the cell surface and the existence of MARCH-III's membrane structure are recognized. (5)The RING finger of MARCH-III is connected to PDZ. (6)MARCH-II and MARCH-III RING finger design The above results show that MARCH-III can be used for membrane transportation.