キネトプラストDNAによるTrypanosoma cruzi原虫株の比較解析

使用动质体 DNA 比较分析克氏锥虫原生动物菌株

• 批准号: 05670232
• 负责人: 三森 龍之
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Kumamoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-05670232/
• 关键词: キネプラストDNA; Trypanosoma cruzi; シャーガス病; 制限酵素切断パターン

シャーガス病の病原体であるTrypanosoma cruzi原虫は分類上1属1種とされてきたが、地域における病原性の違いなどから、株間の差が問題となってきた。今回この原虫株の比較をミトコンドリアDNAに類似したキネトプラスト(k)DNAの制限酵素切断パターンを用いて検討した。用いた原虫株は、パラグアイ国とエクアドル国の患者、保虫動物および媒介昆虫から分離継代したT.cruzi株ならびに標準株5株であった。原虫は、シュナイダー培地にてエピマスティゴート型虫体を培養して用いた。kDNA解析は、虫体をSEバッファー処理し、プロティナーゼk、ザルコシールを加え、高速遠心で核DNAからkDNA分離し除蛋白した後、制限酵素(EcoRI、HaeIII、MspI、HinfI、RsaI)で切断し、4.5%〜10%のポリアクリルアミドグラディエントゲルにて電気泳動を行ない、硝酸銀にて染色しkDNA切断パターンを調べた。その切断パターンには、様々なパターンがみられたが、人、動物、昆虫のそれぞれの生物間で、類似しているということでなく、昆虫から分離した株で、人からの株と非常に似た株もみられた。パラグアイで、あるグループの株は、地域集積性のみられたものもあった。またエクアドルの保虫動物から分離された株で、パラグアイの人から分離された株のグループに類似した株も認められた。一方、血液寒天培地における原虫の動態で、パラグアイの患者から分離されたDG Strain(Original code)は、他の株と形態・増殖性において著しく差が認められたが、そのkDNA切断パターンも他と異なっていた。中南米のトリパノソーマ属では、人に感染報告があるものは、T.cruziの他にT.rangeliがある。また、動物には、他のTrypanosoma spp.感染があり、今後、これらの株も加えて分析し、T.cruziの分類をより明確なものにする研究を進めていく。

シ ャ ー ガ の ス disease pathogen で あ る Trypanosoma cruzi parasite は classification 1 on 1 genus と さ れ て き た が, regional に お け る pathogenicity の violations い な ど か ら between strains, poor の が と な っ て き た. Today back to こ の parasite strains の is を ミ ト コ ン ド リ ア DNA に similar し た キ ネ ト プ ラ ス ト limitations (k) DNA の enzyme cut パ タ ー ン を with い て beg し 検 た. With い た parasite plant は, パ ラ グ ア イ countries と エ ク ア ド ル countries の patients, insect animal お よ び insect vectors か ら separation 継 generation し た tc ruzi strains な ら び に standard strains of 5 strains で あ っ た. Protozoa ダ, シュナ ダ ダ ダ culturation にてエピ スティゴ ト ト ト species を culturation を て use シュナ た た. KDNA parsing は, insect body を SE バ ッ フ ァ ー 処 し, プ ロ テ ィ ナ ー ゼ k, ザ ル コ シ ー ル を え, high-speed telecentric で nuclear DNA か ら kDNA separation し deproteinization し た after the limitations, enzyme (EcoRI, HaeIII, MspI, HinfI, RsaI) で cut し, 4.5% ~ 10% の ポ リ ア ク リ ル ア ミ ド グ ラ デ ィ エ ン ト ゲ ル に て electric line 気 swimming を な い, silver nitrate に て dyeing し kDNA cut パ タ ー ン を adjustable べ た. そ の cut パ タ ー ン に は, others 々 な パ タ ー ン が み ら れ た が, people, animals, insects, の そ れ ぞ れ の で, similar between biological し て い る と い う こ と で な く, insect か ら separation し た plant で, people か ら の seedlings も と very に like た み ら れ た. Youdaoplaceholder0 で で, あるグ あるグ で プ プ <s:1> strain で, regional accumulation <s:1> みられた <s:1> あった あった あった あった あった あった あった あった あった あった あった あった あった あった あった. ま た エ ク ア ド ル の bartender insect animal か ら separation さ れ た plant で, パ ラ グ ア イ の people か ら separation さ れ た strains の グ ル ー プ に similar し た strains も recognize め ら れ た. Side, blood sees the petty に お け る parasite の dynamic で, パ ラ グ ア イ の patients か ら separation さ れ た DG Strain (the Original code) は, he の strains と form the sexual rights colonization に お い て in し く poor が recognize め ら れ た が, そ の kDNA cut パ タ ー ン も he と different な っ て い た. Zhongnan meters の ト リ パ ノ ソ ー マ genus で は, people に infection report が あ る も の は, tc ruzi の he に T.r angeli が あ る. ま た, animal に は, he の Trypanosoma SPP. The infection が あ り, in the future, こ れ ら の strains も plus え て analysis し, tc ruzi の classification を よ り clear な も の に す を る research into め て い く.