血管内皮細胞におけるNO合成酵素の調節機構

血管内皮细胞NO合酶的调控机制

• 批准号: 05670615
• 负责人: 川嶋 成乃亮
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Kobe University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-05670615/
• 关键词: 酸化低比重リポ蛋白質; 血管内皮細胞; NO合成酵素; 内皮由来血管弛緩因子; 低比重リポ蛋白質; リゾホスファチジルコリン; 遺伝性高脂血症家兎; インターフェロン

血管内皮細胞における一酸化窒素合成酵素(ecNOS)の調節機構を検討する目的で以下の検討を行なった。1.ecNOS活性に及ぼす各種脂質の影響:ウシ大動脈内皮細胞よりpollockらの方法を用いてecNOSを抽出し、その活性を^3H-arginineから^3H-citrulineへの変換を用いて測定した。各種の脂質が活性に及ぼす影響を検討すると、リゾフォスファチジルコリン(LPC)、フォスファチジルコリンなどのリン脂質はCa^<2+>ならびにcalmodulin存在下にecNOS活性を増加させるが、アラキドン酸は減少させることが判明した。2.ecNOS mRNA発現に及ぼす各種サイトカイン、脂質の影響:ウシ大動脈内皮細胞よりecNOS cDNAよりRNAプローブを作成しRNAse protection assayを行なった。IFN α β、IFNγはecNOS mRNAを増加させたのに対し、TNFαは減少させた。また酸化LDLならびにLPCはmRNAを増加させた。nativeLDL、HDLは影響を与えなかった。3.動脈硬化血管におけるecNOS mRNAの発現:in situ hybridization法を用いた検討により遺伝性高脂血症家兎大動脈内皮におけるecNOS mRNAの発現は正常家兎血管内皮に比べ増加していることが判明した。以上の検討により血管内皮細胞ecNOS活性は各種脂質により調節されており、またそのmRNA発現はサイトカイン、LPC、酸化LDLにより影響を受けることが判明した。

To investigate the regulatory mechanisms of an enzyme called ecNOS in vascular endothelial cells, the following studies were conducted. 1. The activity of ecNOS and the effect of various lipids on ecNOS activity: the activity of ecNOS in endothelial cells was measured by pollock method. In the presence of calcium and calmodulin, the activity of ecNOS increased, and the activity of calcium and calcium decreased. 2. ECNOS mRNA expression and the effects of various enzymes and lipids: ECNOS RNA expression and RNA protection assay IFN α β, IFNγ and ECNOS mRNA increase and decrease, respectively. LDL and LPC mRNA increased. nativeLDL, HDL and. 3. Expression of ecNOS mRNA in atherosclerotic vessels:In situ hybridization method was used to detect the expression of ecNOS mRNA in atherosclerotic vessels. The expression of ecNOS mRNA in atherosclerotic vessels increased compared with normal vessels. The above results show that the activity of ecNOS in vascular endothelial cells is regulated by various lipids, and the expression of mRNA, LPC and acidified LDL is affected.

项目成果

Y.Matsuda: "High density lipoprotein reveses inhibitory effect of oxidized low density lipoprotein on endothelium-dependent arterial relaxation." Circ Res. 72. 1103-1109 (1993)

Y.Matsuda：“高密度脂蛋白可逆转氧化低密度脂蛋白对内皮依赖性动脉舒张的抑制作用。”

M.Koide: "Expression of nitric oxide synthase by cytokines in vascular smooth muscle cells" Hypertension. 23. 45-48 (1994)

M.Koide：“血管平滑肌细胞中细胞因子表达一氧化氮合酶”高血压。

M.Koide: "Cyclic AMP-elevating agents induce an inducible type of nitric oxide synthase in cultured vascular smooth muscle cells" J Biol Chem. 268. 24959-24966 (1993)

M.Koide：“环 AMP 升高剂在培养的血管平滑肌细胞中诱导诱导型一氧化氮合酶”J Biol Chem。

Y.Ohashi: "Activation of nitric oxide synthase from cultured aortic endothelial cells by phospholipids" Biochem Biophys Res Comm. 195. 1314-1320 (1993)

Y.Ohashi：“磷脂对培养的主动脉内皮细胞的一氧化氮合酶的激活”Biochem Biophys Res Comm。

S.Kawashima: "Regulatory mechanisms of endothelial nitric oxide synthase activity and its modification by lipids and cytokines" Jpn Circ J. 57. 1193-1197 (1994)

S.Kawashima：“内皮型一氧化氮合酶活性的调节机制及其通过脂质和细胞因子的修饰”Jpn Circ J. 57. 1193-1197 (1994)