プログラム細胞死の防御因子であり生存因子であるbcl_2は心筋細胞でも発現しているか?-「心筋細胞がヒトの一生の間死なない」ということの成因に対する免疫組織学的ならびに遺伝子学的アプローチ-

bcl_2，程序性细胞死亡的保护因子和生存因子，也在心肌细胞中表达吗？ - 免疫组织学和遗传学方法解释“心肌细胞在人类生命中不会死亡”的原因 -

• 批准号: 05670641
• 负责人: 藤原 兌子
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Kyoto Women's University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-05670641/
• 关键词: アポプトーシス; 壊死; プログラム細胞死; bcl_2蛋白; bcl_2遺伝子

退治期をすぎた心筋細胞は増殖せずに、一生の間生存し続けることが知られている。細胞死には、従来からよく知られている外的障害因子による壊死(necrosis)の他に、細胞の核にプログラムされた死であるアポプトーシス(apoptosis)すなわちプログラム細胞死がある。そして、ある細胞が生存し続けるためには、bcl_2遺伝子の発現によって生じるbcl_2蛋白のようなプログラム細胞死の防御因子すなわち生存因子が必要であることが分かってきた。そこで、心筋細胞に生存因子としてのbcl_2蛋白およびその遺伝子が存在するか否かを検討した。対象および方法:対象は心内膜心筋生検時にえられた20例のヒト心組織、10匹のBiO14・6マウス心組織である。1)PLL固定後、凍結した組織よりクリオスタットにて4mumの切片を作製し、bcl_2に対するモノクローナル抗体を用いて酵素抗体法を行った。また、cDNAを用いてin situ hybridizationを行った。さらに、無固定の組織を対象に心組織をホモジネートした後にエライザ法およびノザンブロッティング法によりbcl_2の蛋白定量およびmRNAの定量をおこなった。結果および考案:1)ヒトならびにマウスの心組織においてbcl_2に対するモノクローナル抗体を用いた免疫組織学的方法で陽性細胞はみらえず、またエライザ法にても測定限度内にカウントできなかった。すなわちbcl_2蛋白の発現は心組織にみられなかった。bcl_2遺伝子に対するcDNAを用いたノザンブロッテイング法およびin situ hybridizationにおいても陽性所見は心組織に得られなかった。以上より、ヒトおよびマウスの心組織においてはbcl_2蛋白およびbcl_2遺伝子の発現は確認できず、心筋組織が長期にわたって生存する理由をbcl_2という生存因子の観点から説明できなかった。従って、今後の生存因子についてさらに検討していく必要がある。

During the withdrawal period, the heart cells are proliferating, and during the lifetime, the survival period is known. Cell death means necrosis, cell nucleus.にプログラムされた死であるアポプトーシス(apoptosis)すなわちプログラム Cell Deathがある. bcl_2 Protein のようなプログラムcell death のdefense factor すなわちsurvival factor がnecessary であることが分かってきた.そこで, cardiomyocyte survival factor としてのbcl_2 protein およびその伝子がexistent するか不かを検した. Method of 対肖および: 対肖はEndocardial myocardial sinus growth 検时にえられた20 cases of heart tissue, 10 cases of BiO14·6 heart tissue of である. 1) After fixation of PLL, freeze the tissue and slice it into 4mum pieces. Preparation of し, bcl_2 に対するモノクローナル antibody を using いて enzyme antibody method を行った.また、cDNAを Use いてin situ hybridization を行った.さらに、No fixed tissue を対 resembles the heart tissue をホモジネートした后にエライザ法およびノザンブロッティング法によりbcl_2のproteinquantitativeおよびmRNAのquantitativeをおこなった. Result of およびtest case: 1) ヒトならびにマウスの心体においてbcl_2に対するモノクローナルantibodyをThe method of immunohistology is to detect positive cells, and the method of immunohistology is to detect positive cells within the limit. The bcl_2 protein is present in the heart tissue. bcl_2缝子に対するcDNAを用いたノザンブロッテイング法およびin situ Hybridization is positive and the heart tissue is positive. The above より, ヒトおよびマウスの心体においてはbcl_2protein およびbcl_2缝子の発appears and is confirmed.きず, cardiac tissue が long-term にわたってsurvival するreason をbcl_2 というsurvival factor の観Point から explanation できなかった.従って、The survival factor of the future is the necessary がある.