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成人T細胞白血病ウイルスの潜伏感染と再活性化の機構

成人T细胞白血病病毒潜伏感染和再激活机制

基本信息

批准号：
05670922
负责人：
松下修三
金额：
$ 1.28万
依托单位：
Kumamoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1993
资助国家：
日本
起止时间：
1993 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-05670922/
关键词：
ATL HTLV-I 潜伏感染再活性化

项目摘要

HTLV-1はATLだけでなく、HAMや関節炎、ぶどう膜炎などの多臓器病変を起こすことがわかってきた。しかし、HTLV-1がそれらの病変をどのようにして起こすかについては未だ不明のままである。その原因の1つは末梢血中にあるHTLV-1感染細胞の多くが潜伏感染の状態にあることにある。この潜伏感染から再活性化に至る機構の解析はHTLV-1の病原性解明の重要な手がかりとなると考えられる。我々はこれまでにHTLV-1陽性でありながらウイルスRNA及び蛋白が検出されない細胞株3Se6を樹立した。3Se6は患者の腫瘍細胞と同じproviralDNA integrationとT細胞レセプター再構成バンドが観察され、腫瘍細胞と同じクローンと考えられた。またPMA下に培養するとウイルスRNA及び蛋白の発現が認められた。PMAよって再活性化されたHTLV-1は、HOS細胞に合胞体を形成させる能力と、正常T細胞を腫瘍化させる能力があることがわかった。新たに腫瘍化した細胞ではHTLV-1の発現がみられた。これらのことから3Se6におけるウイルスの潜伏感染はウイルス側ではなく細胞側の因子によっていると考えられた。我々は更に潜伏感染機構を調べるため、欠失変異をもつ数種のHTLV-1-LTR-CATを用いてCAT assayを施行し、転写レベルでの解析を行なったが、これまでの結果ではT細胞コントロールと比較しても有意な違いを認めなかった。またHTLV-1-LTRの2lbp結合蛋白(CREB、ATF-1、Ets-1反応性領域結合蛋白)についてもゲルシフトアッセイ法にて解析したがPMA刺激による明らかな差異は認められなかった。(いずれもpreliminary data)これらのことから潜伏機構とHTLV-1-LTRの関係はいまだ明瞭ではないが、更に実験系を改善して検討を続けている。また最近京大グループより提唱されたプロモーター/エンハンサーであるHIRE(HTLV-1 Internal Regulatory Element)-CATを作製し潜伏との関わりを検討中である。一方、pX領域にコードされる蛋白はこれまで既にp40^<Tax>、p27^<Rex>、p21^<Rex>が知られていたが、Franchini.Gら(Proc.Natl.Acad.Sci.USA.89:8813,1992)により更にp12、p13、p30の少なくとも3種類の蛋白が存在することがわかってきた。この中でp12はtransformationとの関与が示唆されており興味深い。我々は3Se6をPMAで再活性化して発現するsubgenomic viral RNAを解析することにより、(1)Hidaka.Mら(The EMBO Journal 7:519,1988)により示されたヒト上皮細胞でのsubgenomic viral RNAの経時的な発現様式をATL患者由来細胞である3Se6において再確認し、(2)pX領域由来のRNAをRT-PCR法により検出し、潜伏感染及びその再活性化との関与の有無について新しい蛋白をコードするmRNAも含めて現在検討中である。

HTLV-1 is resistant to ATL, HAM, arthritis, and multiple organ diseases. The HTLV-1 is not clear. The cause of HTLV-1 infection in the peripheral blood is the state of latent infection. The mechanism of latent infection, reactivation and pathogenesis of HTLV-1 is important. We found that HTLV-1 positive cells were isolated from 3Se6 cells. 3Se6 is the same as the primary DNA integration of tumor cells and T cells. The expression of RNA and protein in culture under PMA is recognized. The ability of PMA to reactivate HTLV-1 cells and HOS cells to form syncytids and the ability of normal T cells to reactivate HTLV-1 cells and HOS cells to form syncytids The development of HTLV-1 in new cells This is the first time I've ever seen a woman who's been infected with a virus. We have changed the latent infection mechanism to adjust the number of HTLV-1-LTR-CAT assays performed, the number of CAT assays performed, the number of T cell assays performed, and the number of T cell assays performed. HTLV-1-LTR 2lbp binding proteins (CREB, ATF-1, Ets-1 reverse domain binding proteins) were analyzed by the method of molecular weight analysis. The relationship between HTLV-1-LTR and the potential mechanism is discussed in detail. HIRE(HTLV-1 Internal Regulatory Element)-CAT is controlled by the HIRE. A protein in the pX domain is known as p40^<Tax>, p27^<Rex>, and p21^<Rex>. Franchini.G.(Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 89:8813, 1992), and a protein in the p12, p13, and p30 domain is known as p12 ^, p27 ^, and p21 ^. The p12 transformation is very interesting. We analyzed subgenomic viral RNA reactivation by 3Se6 in ATL patient-derived cells (1)Hidaka.M (The EMBO Journal 7:519, 1988), which demonstrated the pattern of subgenomic viral RNA reactivation in ATL patient-derived cells (2)pX domain-derived RNA detection, latent infection, and reactivation, and the presence or absence of novel proteins.