ニワトリ型単クローン抗体を用いた主要組織適合(MHC)遺伝子の解析

使用鸡单克隆抗体分析主要组织相容性 (MHC) 基因

• 批准号: 06454117
• 负责人: 山本 義雄
• 金额: $ 3.26万
• 依托单位: Hiroshima University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (B)
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-06454117/
• 关键词: ニワトリ型単クローン抗体; 鶏MHC; Bハプロタイプ; B-G抗原

13種のBハプロタイプごとに各2羽の鶏を選び、抗原として血液を用い、同種免疫を行なった。細胞融合はthymidine kinase欠損ニワトリB細胞株と免疫鶏の脾細胞をPEGを用いて融合させた。26回の細胞融合により、2040個のハイブリドーマが得られ、限界希釈法によるスクーリニングで1032個の抗体産生クローンが得られた。抗体産生クーロンの培養上清を用いて、赤血球凝集反応並びにELISA法によるスクーリニングの結果、赤血球とのみ反応するクローンが113個、赤血球とリンパ球の両方に反応するクーローンが221個、リンパ球とのみ反応するクローンが97個得られた。上記の431個のクローンについて、13種のハプロタイプごとに各2羽の鶏を選び、合計26種のパネルセルを用いた同定試験を行なった。赤血球とのみ反応する113個のクローンのうち、B-G抗原に特異的と思われる24個のクローンが得られた(B9:3個,B11:5個,B12:4個,B31:11個、B32:1個)。赤血球とリンパ球の両方に反応する221個のクーローンについては、87個のクローンがB-F抗原に特異的と思われ、14個のクローンについてハプロタイプ特異性が認められた(B9:2個,B11:4個,B12:4個,B21:2個,B31:1個,B32:1個)。リンパ球とのみ反応する97個のクローンをパネルセルに対するELISA法による反応から7個のクローンがハプロタイプに特異性のあるB-L抗原を認識するものと思われた。B-G抗原のハプロタイプ特異性があるクローン培養上清を用いて、他の研究期間が維持している系統に対する比較同定試験を実施中である。

13 kinds of B. coli, 2 kinds of C. coli, 2 kinds of B. coli, 2 kinds of C. coli, 2 kinds of B. coli, 2 kinds of B Cell fusion with thymidine kinase deficiency in B cell lines and spleen cells using PEG 2040 of the 26 cell fusion sites were identified and 1032 antibody production sites were identified. The results of antibody production in culture supernatant, hemagglutination assay and ELISA were 113, 221 and 97 respectively. The above 431 species were selected, 13 species were selected, 2 species were selected, and 26 species were selected. There were 113 erythrocytes and 24 B-G antigen specific erythrocytes (B9:3,B11:5,B12:4,B31:11, B32:1). There were 221 erythrocytes, 87 erythrocytes, and 14 erythrocytes (B9:2,B11:4,B12:4, B21:2,B31:1,B32:1). 97 of them were identified by ELISA, and 7 of them were identified by ELISA. The specificity of B-G antigen is determined by the culture supernatant and the maintenance of the system during the study.

项目成果

Yamamoto,Y.: "Genetical studies on native chickens in Indonesia." Proced.7th AAAP Anim.Sci.Congr.Bali,Indonesia.2. 193-194 (1994)

Yamamoto,Y.：“印度尼西亚本土鸡的基因研究。”

Asaoka,H.: "Detection of N-glycolylneuraminic acid-containing glycoproteins from various animal erythrocytes by chicken monoclonal antibody against --" J.Vet.Med.Sci.,. 56. 375-377 (1994)

Asaoka,H.：“用鸡单克隆抗体检测各种动物红细胞中含有 N-羟乙酰神经氨酸的糖蛋白——”J.Vet.Med.Sci.,。

Lillehoj,H.S.: "Development and characterization of chicken-chicken B cell hybridomas secreting monoclonal antibodies that detect sporozoite and merozoite -" Poultry Sci.,. 73. 1685-1693 (1994)

Lillehoj,H.S.：“分泌检测子孢子和裂殖子的单克隆抗体的鸡-鸡 B 细胞杂交瘤的开发和表征 -”家禽科学。

Sasai,K.: "A chicken monoclonal antibody to sporozoite of Eimeria acervulina recognizes the conoid antigen by immuno-electron microscopy." Proced.Second Asian Conference on Coccidiosis.11-16 (1994)

Sasai,K.：“抗艾美耳球虫子孢子的鸡单克隆抗体通过免疫电子显微镜识别圆锥体抗原。”