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視交叉上核選択的細胞培養法による時計細胞と同調エレメントの同定

利用视交叉上核选择性细胞培养法鉴定时钟细胞和同步元件

基本信息

批准号：
07670076
负责人：
本間さと
金额：
$ 1.41万
依托单位：
Hokkaido University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1995
资助国家：
日本
起止时间：
1995 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-07670076/
关键词：
サーカディアンリズム細胞培養バゾプレッシン VIP グリア細胞

项目摘要

本研究は哺乳動物の生物時計である視交叉上核(SCN)神経細胞の分散およびスライスの2種の単層培養系を用い、神経ペプチド放出量のサーカディアンリズムを指標に、自律振動機構を細胞レベルで解明することを目的として行われた。実験はウィスター系仔ラットのSCNを用いて行われた。1、伝達物質放出のリズム:分散培養では、SCNの代表的神経伝達物質であるバゾプレッシン(AVP)とVIPの放出量に、培養24時間後よりほぼ同一位相、同一周期のサーカディアンリズムが観察された。両ペプチドリズムは、その後4-6週間に渡り安定して持続し、周期および位相関係は培養期間を通じて一定していた。Well当たりの細胞数、細胞密度によって周期や位相関係に変化は見られなかった。スライス培養でも、同一周期、同一位相のリズムが培養2-6週に渡り安定して存続した。2、視交叉上核グリア細胞の役割:培養1-2日目に分裂阻止剤を投与し、グリア増殖を抑制した培養系では、分裂阻止剤を用いなかった対照群に比較して、分散培養では、両リズムの周期、位相関係に有意の差はみられなかったが、スライス培養では、AVP、VIPリズムが異なる周期でフリーランすることが確認された。3、考察および結論:シナプス結合の欠如した、培養の初期からペプチド分泌にリズムが存在することから、液性連絡によるリズム周期が考えられる。分裂阻止剤の投与によりスライス培養で観察された両リズム間の脱同調は、ラットSCNが少なくとも2つの振動体から構成されることを示しており、SCNのグリア細胞が両振動体のカップリングに重要な役割を果たしている可能性が高い。分散培養での脱同調の欠如は、SCN内の構造の維持が各ペプチド細胞間のカップリングに重要であることを示唆している。

In this study, two kinds of single-layer culture systems were used in the study of mammalian biological timepieces. The dispersed cells of the suprachiasmatic nucleus (SCN) were used in this study.経ペプチド emission amount indicator, autonomous vibration The mechanism of action is the purpose of action and the action of action.実験はィスター Department ラットのSCNを用いて行われた. 1. Dispersed culture material releasing material: Dispersed culture system, SCN's representative god material releasing material, AVP (AVP) The released amount of VIP is the same, and the same phase and the same cycle are used after 24 hours of cultivation.両ペプチドリズムは, the period 4-6 weeks after the その, the stable and steady してhold 続し, the periodic および phase relationship, the cultivation period, the を通じて is certain, していた. Well, the relationship between the number of cells and the density of cells and the period and phase is correct. The スライスcultivation でも, the same cycle, the same phase のリズムが culture 2-6 weeks に多り stabilization して続した. 2. Cutting of suprachiasmatic nucleus cells: culture for 1-2 days to prevent the division of cells and add cells.アPropagation を inhibition した culture system では, division inhibition をいなかった対ににして、 disperse Cultivate では, 両リズムのcyclical, phase relationship にmeaningful のdifferent はみられなかったが, スライスtrain Raising the では, AVP, VIP リズムがdifferent なるcyclic でフリーランすることが confirmed された. 3. Conclusion of the investigation: the combination of のナプスの无如した, and the initial stage of cultivation からペプチド分The secretion of the existence of the secretion and the liquid connection of the liquid connection are the cycle of the secretion and the examination of the liquid. Split prevention 剤のinvestment and によりスライスcultivation で観看された両リズム间のdeviotongtune は、ラットSCNが小なくとも2つのvibrating body からThe possibility of forming the されることをshows しており and the SCN のグリアcell vibration body のカップリングにimportant なservice cut をfruit たしている is high. It is important to desynchronize and maintain the structure within the SCN and maintain the structure between cells in dispersed culture.