权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

分子フィードバックループによるリズム発振と細胞間クロストークによる脳内時計の形成

通过分子反馈回路和细胞间串扰引起的节律振荡形成脑时钟

基本信息

批准号：
17021002
负责人：
本間さと
金额：
$ 4.61万
依托单位：
Hokkaido University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2005
资助国家：
日本
起止时间：
2005 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-17021002/
关键词：
神経科学生理学遺伝子発現抑制生物発光

项目摘要

哺乳類の生物時計、視交叉上核(SCN)は固有の周期をもつ時計細胞により構成され、細胞間リズム同調により安定した単一周期のリズムを全身に発振していると考えられるが、その機序は不明である。本研究では、時計遺伝子の転写調節フィードバックループの動きを、生物発光レポーターマウスやラットを用いて測定し、SCN内の部位特異性と細胞間同調について検討した。1.SCN内時計細胞の多様性の検討時計遺伝子Per1のプロモーター支配下にルシフェラーゼを発現するPer1-Lucマウスを用い、培養SCNにおけるPer1発現の発光リズムを連続測定した。SCNに蛋白合成阻害剤cyclohexamide(CHX)を投与し、washout後の発光リズムを解析した。その結果、6時間のCHX投与後はPer1の発光リズムが二峰性となった。CCDカメラを用いた一細胞解析の結果、SCNには位相の異なる2群の細胞の存在すること、両群はCHXに対し異なる位相反応を示すことが分かった。2.SCN内の朝と夕を支配する二振動体の検索長日(LD18:6)と短日(LD6:18)条件下で数週間飼育したラット脳を用い、Digoxigeninラベルプローブを用いた3時間毎のin situ hybridizationを行った。全SCN内での時計遺伝子Per1・Per2発現リズムを測定し、SCN内の朝夕を支配する振動体の局在と分子機構について検討した結果、SCNにおけるPer1発現リズムは明期開始一致で、長日・短日とも発現パターンに有意差が少なく、Per2発現リズムは、長日・短日とも、下降位相が活動開始位相とほぼ一致することが明らかとなった。以上の2実験の結果、SCNには反応性の異なる分子時計をもつ細胞の存在が明らかとなった。また、Per1とPer2はそれぞれ朝・夕の行動を支配する振動体に関与することが示唆された。

In mammals, the biological timing of mammalian animals, the inherent cycle time of the supranucleus of the visual chiasma (SCN), the cell cycle, the cell cycle, the whole body vibration, the sequence of the cell, the whole body, and the unknown sequence. The purpose of this study is to measure the specific properties of SCN in the same way as those in the internal parts of the body. Under the control of the 1.SCN cell multi-cycle time analyzer, the Per1 device is used to detect the use of the Per1-Luc device, and the SCN device Per1 is used to detect the optical link test. SCN protein synthesis hinders cyclohexamide (CHX) injection. After washout, the protein synthesis was analyzed. The results showed that after 6 hours of CHX, the subsequent Per1 phosphorescence showed a two-peak response. The results of one-cell analysis of CCD data show that there are two groups of cells in SCN phase analysis, and the opposite position of CHX cells shows that there is a difference between two groups of cells. The day and night in the 2.SCN dominates the use of dual-vibration equipment for long days (LD18:6) and short days (LD6:18). Under the condition of long days (LD18:6) and short days (LD6:18), it is necessary to run the in situ hybridization during the three-hour cycle. The whole SCN chronograph, Per1. Per2, the SCN, the day and night control of the vibrator, the molecular machinery, the SCN, the Per1, and the long-term, short-day, long-term, short-term, long-term, short-term, The falling phase starts the phase. The phase is the same. The results of the above two experiments and the time analysis of SCN anti-inflammatory agents show that there is a clear evidence that there is a correlation between them. The morning, Per1, Per2, morning and evening actions dominate the vibration and instigate the movement.