神経細胞塩素イオンポンプATPアーゼの遺伝子構造と発現

神经元氯泵ATP酶的基因结构和表达

• 批准号: 07670124
• 负责人: 原 満良
• 金额: $ 1.02万
• 依托单位: Kansai Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 1996
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-07670124/
• 关键词: 塩素イオンポンプ; ATPアーゼ; 神経細胞

1.ラットおよびブタ脳より、分別遠心分離、EDTA・高塩濃度処理により、Cl^--ATPaseを多く含む膜分画を調整した。これを非イオン性界面活性剤 MEGA-10により可溶化し、MONO-Qカラムクロマトグラフィー、及び、ポリアクリルアミドゲル電気泳動により、Cl^--ATPaseを部分精製した。2.Cl^--ATPaseは、分子量約500kDaの酸性蛋白であり、高マンノース型糖鎖を結合しているものと考えられる。SDS-PAGEの結果より、主要サブユニットとして、97、64、60、および47kDaのペプチドを同定した。3.これをウサギに免疫し、酵素活性を部分的に阻害する抗体を得た。この抗体は、60kDaのサブユニットに結合するものであった。4.上記の結果得られたCl^--ATPaseの主要サブユニットそれぞれについて、N末端アミノ酸配列分析を試みたところ、いずれもいわゆるNブロックの状態であった。5.以上の結果は、第68回および第69回日本薬理学会総会、第87回日本薬理学会近畿部会、および第15回国際神経化学会議に発表済または発表予定である。

1. ラ ッ ト お よ び ブ タ 脳 よ り, separate far heart, EDTA, high salt concentration 処 に よ り, Cl ^ - ATPase を painting を く contain む membrane more point adjustment し た. こ れ を non イ オ ン interface of sexual activity tonic MEGA - 10 に よ り solubilization し, MONO - Q カ ラ ム ク ロ マ ト グ ラ フ ィ ー, and び, ポ リ ア ク リ ル ア ミ ド ゲ ル electric 気 swimming に よ り, Cl ^ - ATPase を part refined し た. 2. Cl ^ - ATPase は, molecular weight of about 500 kda の acidic protein で あ り, high マ ン ノ ー ス type lock を combining sugar し て い る も の と exam え ら れ る. Sds-page の results よ り, main サ ブ ユ ニ ッ ト と し て, 97, 64, 60, お よ び 47 kda の ペ プ チ ド を be し た. 3. Youdaoplaceholder2 inhibitory する antibodies を of the <s:1> immune れをウサギに and enzyme activity を parts た obtain た. <s:1> <s:1> antibody, 60kDa サブユニットに サブユニットに binding する であった であった であった. 4. Written の results have ら れ た Cl ^ - ATPase の main サ ブ ユ ニ ッ ト そ れ ぞ れ に つ い て, N terminal ア ミ ノ acid with column analysis を try み た と こ ろ, い ず れ も い わ ゆ る N ブ ロ ッ ク の state で あ っ た. 5. The above <s:1> results <e:1>, the 68th および, 69th Japan Pharmaceutical Society 総 meeting, 87th Kinki Branch of Japan Pharmaceutical Society, および, 15th International Shinken Chemical conference に report form, the また report form confirmed である.

项目成果

Zeng X-T. et al.: "Cl^- pump in rat brain" Jpn. J. Pharmacol.67. 308- (1995)

曾晓涛.

Hara M. et al.: "Molecular characteristics of hog brain Cl^--ATPase." J. Neurochem.65. S180- (1995)

Hara M. 等人：“猪脑 Cl^-ATP 酶的分子特征。”

Mikami Y. etbal.: "Artial natriuretic peptide stimulates Cl transport in retinal pigment epithelial cells." Curr. Eye Res.14. 391-397 (1995)

Mikami Y. 等人：“人工钠尿肽刺激视网膜色素上皮细胞中的 Cl 转运。”

Inagaki C. et al.: "Characteristics of rat brain chloride-stimulated adenosine triphosphatase as an active chloride extrusion" J. Neurochem.65. S180- (1995)

Inagaki C. 等人：“大鼠脑氯化物刺激的三磷酸腺苷酶作为活性氯化物挤出的特征”J. Neurochem.65。

Yasukura T. et al.: "Adrenergic receptor-mediated Cl^- transport in rabbit corneal endothelial cells." Jpn. J. Pharmacol.67. 315-320 (1995)

Yasukura T. 等人：“兔角膜内皮细胞中肾上腺素受体介导的 Cl^- 转运。”