ネズミ糞線虫幼虫のラット体内移行の研究、特にケモタキシスの役割

大鼠类圆线虫幼虫内化入大鼠体内尤其是趋化作用的研究

• 批准号: 07670280
• 负责人: 多田 功
• 金额: $ 1.54万
• 依托单位: Kyushu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-07670280/
• 关键词: ネズミ糞線虫; 第3期幼虫; 体内移行; ケモタキシス

ネズミ糞線虫感染型幼虫(L_3)がどのような機構でラットのターゲット臓器に到達するかを解明するためケモタキシスと移行経路を検討した。1)まずin vitroの実験ではアガロース寒天平板上で幼虫はラット、モルモット、牛、ブタ、ハムスターの血清(50%v/v)に顕著な集積を示し、牛血清では濃度に比例して幼虫集積性は低下した。次にCentricon10を用いて透析血清中蛋白と無機質分離を行いテストしたところ、10KDa retentateには顕著な集積性を示した。逆に10KDa filtrateでは著しい低下が認められた。この低下は0.85%NaCLを添加するとほぼ同じレベルまで回復した。更にL_3はアルブミンに対してラット血清と同等の集積性を示したが、集積性は濃度に比例した。3.5%の透析ペプトン、トリプトース、トリプトン、還元型グルタチオンの中ではペプチン類3種に対し集積性を示した。ネズミ糞線虫L_3は哺乳動物の血清蛋白に集積性を示すが、分子量が小さくなるに従って低下し、アミノ酸や小さなペプチドには全く反応しないことが明らかとなった。2)in vivoにおけるネズミ糞線虫L_3のラット頭部内移行とその経路を可視的に観察するため、オートラジオグラムを行った。L_1を糞便内のステージで^<35>S-methionineをもってラベルし、4日間培養して得たL_33,000個体をラットに皮下注射で投与した。24-26時間後に感染ラット頭蓋部を液体窒素で凍結して各方向の割断面にX-線フイルムを密着させ、10日間冷凍庫中に放置し、フイルムを現像した。その結果、ラベルされたL_3に対応するドット分布は以前私達が観察した区域(Tada et al、1979)に見られ、この寄生虫の頭部移行を確実に示した。

A study on the migration route of the larvae (L_3) infected by the parasite, which were found in the organs of the host, was carried out. 1) In vitro, the concentration ratio of larvae in serum (50%v/v) of bovine, broiler and broiler larvae on cold plate was lower than that in vitro. Centricon10 is used to separate protein and inorganic substances in serum. 10KDa retentate is used to collect protein. 10KDa filtrate This is a low 0.85%NaCl addition. In addition, L_3 has a high concentration of serum, which is equivalent to the concentration of serum. 3.5% of the dialysis, separation, separation, reduction of the three types of separation, aggregation L_3 has been shown to be a highly aggregative, low molecular weight, and highly reactive species in mammalian serum proteins. 2)In vivo, the L_3 head moves along the visible path of the L_3 head, and the L_3 head moves along the visible path. L_1 was <35>cultured in feces for 4 days and L_33,000 individuals were injected subcutaneously. 24-26 After the infection, the head part of the liquid is frozen, and the X-ray is closely adhered to the cutting surface in each direction. After 10 days, the liquid is placed in the freezer and appears. The results showed that the distribution of the parasite in the L_3 region was similar to that observed in the previous study (Tada et al, 1979), and the head migration of the parasite was confirmed.