好脂質性皮膚常在真菌Malassezia furfurが産生するアレルゲンの分析

亲脂性皮肤寄生真菌糠秕马拉色菌产生的过敏原分析

• 批准号: 07670551
• 负责人: 安枝 浩
• 金额: $ 0.38万
• 依托单位: National Research Institute for Child Health and Development
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 1996
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-07670551/
• 关键词: Malassezia furfur; マラセチア; アレルゲン; アトピー性皮膚炎; 真菌アレルギー

M.furfurの粗抗原をIgE-immunoblotで分析すると、多数のアレルゲン成分が検出される。今年度はその中で、分子量が20,000付近の成分の分析を実施した。2種類のM.furfurアレルゲン,MF1,MF2の精製とその性質M.furfur TIMM2782株の菌体破砕抽出液の硫安50-〜90%飽和で沈殿する画分(P2)を出発原料として、陰イオン交換クロマトグラフィ、ゲル濾過クロマトグラフィ、メタルキレートクロマトグラフィを組み合わせることによってMF1MF2と名付けた2種類のアレルゲンを単離した。MF1,MF2のSDS-PAGEにおける分子量は、還元条件下ではそれぞれ21,000、20,000非還元条件下ではいずれも40,000であり、両者はいずれもS-S結合を介したホモダイマーであると推定された。また、等電点はMF1が4.7、MF2が4.8であった。MF1のN末端アミノ酸配列は28残基まで明らかになったが、既知タンパク質の配列との相同性は見い出されなかった。一方、MF2のN末端アミノ酸配列は分析不能で、N末端がブロックされているものと考えられた。MF1,MF2のアレルゲン活性MF1,MF2のアレルゲン活性は、RASTによるIgE抗体の測定、および末梢血白血球からのヒスタミン遊離試験によって調べた。RASTにおいては、M.furfur粗抗原に対するIgE抗体が陽性(>0.7PRU/ml)の30例のアレルギー患者のうち、MF1に陽性は20例(66.7%)、MF2に陽性は19例(63.3%)であった。一方、ヒスタミン遊離試験は22例の患者で実施した。遊離曲線に用量依存性があり、かつ最大遊離率が20%以上を示した例を陽性とすると、P2画分に対して陽性の14例のうち、MF1に対しては8例(57.1%)、MF2に対しては7例(50%)が陽性であった。まとめM.furfur菌体破砕抽出液から分子量が約40,000の2種類のアレルゲン、MF1,MF2を単離、精製した。RAST、ヒスタミン遊離試験の結果から、両者はともにM.furfurの主要なアレルゲンであると考えられた。

The crude antigen of M.furfur was analyzed by IgE-immunoblot, and most of the RNA components were detected. This year, the analysis of the composition with molecular weight of 20,000 was carried out. Purification and properties of 2 species of M.furfur, MF1, MF2 strain of M.furfur TIMM2782 strain of bacterial extract of sulfur safety 50-~ 90% saturation of the precipitation of the composition (P2) to develop raw materials, Yin exchange, filter, filter, mix, mix, SDS-PAGE of MF1 and MF2 showed that the molecular weights of MF1 and MF2 were 21,000 and 20,000 under reductive and non-reductive conditions, respectively, and 40,000 and 40,000 under non-reductive conditions. The isoelectric point is MF1 = 4.7, MF2 = 4.8. N-terminal amino acid sequence of MF1 is identical to that of 28 residues. One side, MF2 N-terminal acid alignment analysis can not be, N-terminal acid alignment can be, N-terminal acid alignment can not be, N-terminal acid alignment can be, N-terminal acid alignment can not be, N-terminal acid alignment can be, MF1,MF 2 and their activities are regulated by RAST, IgE antibody assay, and peripheral white blood cell assay. RAST, M.furfur crude antigen were detected in 30 patients (> 0.7 PRU/ml), MF1 positive in 20 patients (66.7%), MF2 positive in 19 patients (63.3%). One of the 22 patients was treated with a free trial. The dose dependence of dissociation curve was positive in 14 cases, positive in 8 cases (57.1%) and positive in 7 cases (50%) for MF1 and MF2 respectively. M.furfur cell extract was isolated and purified from two kinds of molecular weight of about 40,000. RAST,