モノクローナル抗体を用いたELISAによるヒョウヒダニ主要アレルゲンの定量

使用单克隆抗体通过 ELISA 对尘螨主要过敏原进行定量

• 批准号: 05670439
• 负责人: 安枝 浩
• 金额: $ 0.38万
• 依托单位: National Research Institute for Child Health and Development
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-05670439/
• 关键词: アレルゲン; ヒョウヒダニ; モノクローナル抗体; ELISA; 室内塵; アレルゲンエキス標準化

マウスモノクローナル抗体を用いる酵素免疫測定法(mAb-ELISA)によって、我が国に生息する2種類のヒョウヒダニ、ヤケヒョウヒダニとコナヒョウヒダニの2つのグループの主要アレルゲン、Der pI/Der fIとDer pII/Der fIIの合計4種類のアレルゲンを測定するシステムを確立した。マイクロプレートのウエルにコートした1次抗体にアレルゲン試料を反応させ、それに対してビオチン化2次抗体、次いで酵素標識ストレプトアビジンを反応させた後、基質を加えて発色させて酵素活性を検出するという方法である。このmAb-ELISAは十分な検出感度(1ng/mlまたはそれ以上)と、一般的な研究室で容易に実施することのできる実用性を有していた。Der pIとDer fI、あるいはDer pIIとDer fIIの間で全く交差反応することなく高い種特異性があった。特に、Der pIIとDer fIIの分別定量は世界的にみてもこれまでに報告例がない。mAb-ELISAで測定した室内塵試料中のDer pI/Der fIおよびDer pII/Der fIIの量は、すでに報告したウサギの抗体を用いるラジオイムノアッセイ、およびELISAによる測定値と極めて高い相関を示した(r>0.95)。また、室内塵試料中のダニ虫体数、アカレックステストによるグアニン量とも有意に相関した。更に、室内塵試料中のDer pIとDer fIの割合、あるいはDer pIIとDer fIIの割合は、形態学的に同定したヤケヒョウヒダニとコナヒョウヒダニの虫体数の割合と非常によく相関し、これらの割合は両種のダニの分布割合を正確に反映していると考えられた。以上の結果から、mAb-ELISAによるDer pI/Der fIとDer pII/Der fIIの定量法は、室内環境中のダニアレルゲン量の評価、およびダニ、室内塵アレルゲンエキスの標準化という目的に有用であると考えられた。

The antibodies were detected by enzyme immunoassay (mAb-ELISA). In our country, we did not know how to use the enzyme immunoassay (mAb-ELISA). In our country, we used the enzyme immunoassay (mAb-ELISA) to determine the accuracy of the enzyme immunoassay (Elisa). This is the first time that the antibody has been detected, the antibody has been detected twice, the antibody has been purified twice, and the enzyme activity has been detected. After that, the enzyme activity has been detected in the method. "mAb-ELISA" is very sensitive (1ng/ml sensitivity is above), and the general "laboratory" is easy to use. Der pI, Der fI, Der pII, Der fII, full cross-section, cross-section, high-profile, high-performance, high-performance, high-performance Special and Der pII Der fII separately quantify the information of the world. MAb-ELISA determination of Der pI/Der fI, Der pII/Der fII, report, antibody, ELISA, ELISA, temperature, temperature The number of worms in the indoor material, the number of worms, the number of worms in the indoor material. In indoor materials, the Der pI Der fI cut, the Der pII Der fII cut, the same morphology, the number of worms, the number of worms, the number of eggs, the number of worms, the number of The results of the above results, mAb-ELISA analysis, Der pI/Der fI Der pII/Der fII quantitative analysis, indoor environmental monitoring, indoor environmental monitoring, and indoor environmental monitoring are useful for the purpose of standardization of environmental standards.

项目成果

安枝 浩: "ダニアレルゲンの定量法について アルギンの臨床" 13. 1993. (464-467)

安枝浩：《关于螨虫过敏原的定量方法：褐藻胶的临床实践》13. 1993. (464-467)