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無血清培養下における血管内皮細胞の管腔形成過程を制御する因子群の解析

无血清培养血管内皮细胞管形成过程的控制因素分析

基本信息

批准号：
07670946
负责人：
戸田憲一
金额：
$ 1.15万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1995
资助国家：
日本
起止时间：
1995 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-07670946/
关键词：
血管内皮細胞無血清培地分化管腔形成細胞外基質

项目摘要

我々は、かつて樹立したマウス皮膚由来血管内皮細胞株F-2(Cancer Res. 50, 5526, 1990)の培養条件を変化させ、血清濃度を漸減させることにより、完全無血清培地コスメヂウム001(COS)内で増殖可能な亜株F-2Cを樹立した。F-2CはCOS内で良好に増殖するのみならず、コンフルエントになった後、自発的に分化し、管腔構造を形成すること、すなわち、F-2Cは血管新生の新たなin vitroモデルになり得ることが明らかととなった。また、このF-2Cによる管腔構造の誘導はCOS内に1%の血清を添加することにより完全に抑制されることより、血清中に何らかの管腔形成抑制因子の存在が予見された。また、この管腔構造の誘導に対応して、F-2C細胞下に細胞外基質、特に4型コラーゲンとラミニンの沈着が著名に増加し、この沈着は、血清添加により抑制されることより、F-2Cによる管腔構造の誘導は、細胞下における基低膜成分の沈着が重要であることが示唆された。また、F-2Cによる管腔形成に伴い、その条件つき培養液内には、メタロプロテアーゼ、とくにMMP2とMMP9の活性化が関与する可能性も示された。この酵素活性は、無血清培養下で、実際に認められ、4、5型コラーゲンをはじめとする複数の細胞外基質の完全あるいは部分的な分解を実現した。また、この分解活性は、血清添加により抑制された。F-2Cの増殖あるいは管腔形成誘導は、既知の各種血管新生促進あるいは抑制物質群に対して、それぞれ促進あるい抑制的に反応することが示され、この細胞株が血管新生作用物質のモニターに有用かつ簡便なモデルを提供することが示された。

In this study, we established a skin-derived vascular endothelial cell line F-2(Cancer Res. 50, 5526, 1990) by changing culture conditions and decreasing serum concentration. F-2C is a good growth factor in COS, and it can be divided into two parts. F-2C is a good growth factor in COS. F-2C was found to inhibit the induction of lumen formation in COS by adding 1% of serum to COS. In addition, the induction of lumen structure in F-2C cells, especially extracellular matrix, type 4 protein, and the deposition of protein in F-2C cells were significantly increased, and the deposition of protein in F-2C cells was significantly inhibited by serum addition. The possibility of activation of MMP-2 and MMP-9 in culture medium was demonstrated. The enzyme activity was detected in serum-free culture, and the enzyme activity was detected in serum-free culture. The activity of this enzyme was inhibited by the addition of serum. The proliferation of F-2C can be induced by a variety of known angiogenesis promoting and inhibiting substances. The proliferation of F-2C can be induced by a variety of angiogenesis promoting and inhibiting substances.