ヒト造血細胞のアポトーシスに関する基礎的並びに臨床的研究

人类造血细胞凋亡的基础与临床研究

• 批准号: 07671198
• 负责人: 吉田 弥太郎
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-07671198/
• 关键词: アポトーシス; DNA切断化; エンドヌクレアーゼ; 急性白血病; 骨髄異形成症候群; 血球分化

1.エンドヌクレアーゼの単離:ヌクレオソーム間のDNA断片化はアポトーシスの生化学的特徴であり、エンドヌクレアーゼの作用によるとされる。われわれはヒト白血病細胞や造血系細胞で自己核消化法を用いて、Mgイオン・Mnイオン依存性ヌクレアーゼが存在することを報告してきた。本研究では培養白血病細胞P39の細胞亜分画からMgイオン・Mnイオン依存性に標的細胞核DNA断片化を誘発しうるヌクレアーゼ活性の分析を行い、核内の分子量30Kdの蛋白を発見した。この核内蛋白“End 30"がアポトーシスに関与しているとの直接的根拠はないが、標的細胞核のDNA断片化、3'OH末端活性、Znイオンによる阻害などよりアポトーシスとの関連が強く示唆される。2.各種エンドヌクレアーゼの造血細胞内の分布われわれの開発した自己核消化法での検討では、血球の核内エンドヌクレアーゼにはEND30のほかに、Caイオン・Mgイオン依存性ヌクレアーゼと酸性ヌクレアーゼとの少なくとも3種類が存在する。END30は白血病やMDSの芽球以外にも、幹細胞、赤芽球、T細胞、B細胞、単球、NK細胞、巨核球にみられる。Caイオン・Mgイオン依存性ヌクレアーゼは、幹細胞、赤芽球、未分化及び分化顆粒球、単球、NK細胞、巨核球にみられる。酸性ヌクレアーゼは各分化段階の顆粒球、T細胞、NK細胞、単球などに存在する。ヌクレアーゼの血球内分布の意義は不明であるが、アポトーシスが系統発生的にconserveされていることから、Mgイオン依存性エンドヌクレアーゼを原型とする酵素群のファミリーを形成する可能性が考えられる。3.DNA strand break法によるアポトーシス評価本法で骨髄生検組織を検索したが、その成績の判定には少なくともパルスフィールド法の併用が必要と考えられた。

1. エ ン ド ヌ ク レ ア ー ゼ の 単 from: ヌ ク レ オ ソ ー ム の DNA fragment is changed between は ア ポ ト ー シ ス の 徴 of biochemistry で あ り, エ ン ド ヌ ク レ ア ー ゼ の role に よ る と さ れ る. わ れ わ れ は ヒ ト leukemia cells や を hematopoietic cells で their nuclear digestion method using い て, Mg イ オ ン, Mn イ オ ン dependency ヌ ク レ ア ー ゼ が exist す る こ と を report し て き た. This study で は develop leukemia cells P39 の cells 亜 points draw か ら Mg イ オ ン, Mn イ オ ン dependency に target nucleus DNA fragment the を 発 lure し う る ヌ ク レ ア ー ゼ active line を い の analysis, nuclear の molecular weight within 30 kd の protein を 発 see し た. 30 "こ の nuclear protein" End が ア ポ ト ー シ ス に masato and し て い る と の direct root 拠 は な い が の nucleus DNA fragment, mark, the 3 'End OH activity, with recent イ オ ン に よ る resistance against な ど よ り ア ポ ト ー シ ス と の masato even strong が く in stopping さ れ る. 2. Various エ ン ド ヌ ク レ ア ー ゼ の の hematopoietic cell distribution わ れ わ れ の open 発 し た their nuclear digestion method で の beg で 検 は, blood の nuclear エ ン ド ヌ ク レ ア ー ゼ に は END30 の ほ か に, Ca イ オ ン · Mg イ オ ン dependency ヌ ク レ ア ー ゼ と acid ヌ ク レ ア ー ゼ と の less な く と も 3 types が す る. END30 や leukemia やMDS other than the embryonic bud に に stem cells, red bud cells, T cells, B cells, 単 globules, NK cells, megakaryocyte にみられる. Ca イ オ ン · Mg イ オ ン dependency ヌ ク レ ア ー ゼ は, stem cells, red gemmule, undifferentiated and び differentiation particles ball, 単 ball, NK cells, giant nuclear に み ら れ る. Acidic ヌ, レア, ゼ, ゼ each differentiation stage of <s:1> granular spheres, T cells, NK cells, and 単 spheres な <s:1> に に exist in する. ヌ ク レ ア ー ゼ の の meaning within the blood distribution unknown は で あ る が, ア ポ ト ー シ ス が system 発 raw に conserve さ れ て い る こ と か ら, Mg イ オ ン dependency エ ン ド ヌ ク レ ア ー ゼ を prototype と す る enzyme group の フ ァ ミ リ ー を form す る possibility が exam え ら れ る. 3. DNA strand break law に よ る ア ポ ト ー シ ス review 価 provisions で bone marrow 検 organizes を 検 cable し た が, そ の grades の determine に は less な く と も パ ル ス フ ィ ー ル の ド method using が と necessary test え ら れ た.

项目成果

N. Anzai, H. Kawabata, Y. Yoshida et al.: "Types of nuclear endonuclease activity capable of inducing internucleosomal DNA fragmentation are completely different between human CD34^+ cells and their their granulocytic descendants." Blood. 86(3). 917-923 (

N. Anzai、H. Kawabata、Y. Yoshida 等人：“能够诱导核小体间 DNA 断裂的核内切核酸酶活性类型在人类 CD34^ 细胞及其粒细胞后代之间完全不同。”

K. Tohyama, Y. Tohyama, T. Nakayama et al.: "A novel factor-dependent human myelodysplastic cell line, MDS92, contains haemopoietic cells of several lineages." British Journal of Haematology. 91(4). 795-799 (1995)

K. Tohyama、Y. Tohyama、T. Nakayama 等人：“一种新型因子依赖性人类骨髓增生异常细胞系 MDS92，包含多个谱系的造血细胞。”

Y. Yoshida, T. Nakahata, A. Shibata et al.: "Effects of long-term treatment with recombinant human granulocyte-macrophage colony-stimulating factor in patients with myelodysplastic syndrome." Leukemia and Lymphoma. 18. 457-463 (1995)

Y. Yoshida、T. Nakahata、A. Shibata 等人：“重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子长期治疗骨髓增生异常综合征患者的效果”。

Y. Yoshida: "Myelodysplastic syndromes with monosomy 7 and granulocyte colony-stimulating factor." Internal Medicine. 34(9). 820-821 (1995)

Y. Yoshida：“具有 7 号单体和粒细胞集落刺激因子的骨髓增生异常综合征。”

Y. Yoshida: "Apoptosis in myelodysplasia: A paradox or paradigm." Leukemia Research. 19(12). 887-891 (1996)

Y. Yoshida：“骨髓增生异常中的细胞凋亡：一个悖论或范式。”