分裂酵母のリボソームRNA遺伝子の転写制御ネットワークの解明

阐明裂殖酵母核糖体 RNA 基因的转录控制网络

• 批准号: 07680746
• 负责人: 禾 泰壽
• 金额: $ 1.41万
• 依托单位: Saitama Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-07680746/
• 关键词: 分裂酵母; RNAポリメラーゼI; RPA12; two-hybrid

1。分裂酵母(Schizosaccharomyces pombe) RNAポリメラーゼI(pol I)サブユニットSpRPA12の単離、解析-分裂酵母RNAポリメラーゼIは少なくとも11サブユニットから構成されているが、クローン化されたのは第1(最大)サブユニットSpRPA190の遺伝子のみである。本研究では出芽酵母(Saccharomyces cerevisiae)のpolI特異的サブユニットScRPA12に相当する分裂酵母polIサブユニットSpRPA12の単離、解析を行った。ScRPA12は122アミノ酸からなり2つのZnフィンガーを含み、その欠失変異株Δrap12::LEU2は高温で増殖できない温度感受性増殖を示す。そこで出芽酵母rap12変異を宿主にして出芽酵母で発現できるようにした分裂酵母cDNAバンクを形質転換し、高温で増殖できるようになった形質転換株より分裂酵母cDNAを回収し調べた結果、3'側非翻訳領域の長さが異なるが翻訳領域は同じであるSpRPA12cDNAが3種類単離された。SpRPA12は119アミノ酸からなり2つのZnフィンガーを有していてScRPA12に対して58%同一性、94%相同性を示した。この事からSpRPA12はScRPA12の構造的、機能的ホモログである事が明らかになった。現在SpRNA12の機能を調べるため遺伝子破壊を行っている。2。分裂酵母poll第1サブユニットSpRPA190をbaitにして酵母two-hybrid systemを用いてSpRPA190と相互作用をする蛋白をコードする分裂酵母cDNAの単離、解析-SpRPA190のカルボキシル末端(1364-1689アミノ酸残基から成る領域)に相互作用する蛋白をコードするcDNAは2種類単離された。DNA塩基配列を部分的に決め、データーベースを調べたが既知の遺伝子とのホモロジーは示されなかった。現在塩基配列を正確に決めている。一方SpRPA190のアミノ末端(1-329アミノ酸残基からなる領域)と相互作用する蛋白をコードするcDNA候補は単離されなかった。3。RNAポリメラーゼIIによる35SrRNA遺伝子の転写に関しては本年度はプラスミドの構築の段階で終了した。次年度に繰り越す。

1。Schizosaccaromyces pombe RNA diversity I(pol I) In this study, the separation and analysis of Saccharomyces cerevisiae polI-specific proteins were studied. SCRPA12::LEU2:: Temperature sensitive propagation is demonstrated by high temperature propagation. The budding yeast rap12 cDNA was isolated from the budding yeast by three different species: morphological transformation, high temperature propagation, and the length of the 3'-sided non-inverted domain. SpRPA12 has 58% identity and 94% identity. The structure and function of SCRPA 12 are different from those of SCRPA12. SpRNA12 is now functional and functional. 2。Splitting yeast poll 1st cell protein SPRPA190 baits and yeast two-hybrid system uses SPRPA190 to interact with proteins. Splitting yeast cDNA isolation, analysis-SPRPA190 has two different types of interacting proteins. DNA sequence analysis, DNA sequencing and DNA sequencing Now the base alignment is correct. A cDNA candidate for the interaction of SpRPA190 and its amino acid residues (1-329) 3。RNA sequencing II is the end of the 35S rRNA sequencing phase this year. The next year is more than a year.