RNAポリメラーゼI発現系を利用したC型肝炎ウイルス増幅系の開発

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現在、C型肝炎に対する治療法はインターフェロン(免疫賦活化)およびリバビリン(ウイルス複製阻害)の併用療法しかなく、この治療法ですら奏効率は50%に過ぎない。C型肝炎ウイルス(HCV)はチンパンジーにしか感染せず、マウスなどの小動物を用いたin vivo HCV感染系が未開発だったこと、効率的なHCV増幅系が存在しないことが、C型肝炎治療薬創製を困難なものにしていた。最近、ヒト肝臓キメラマウス作製技術が開発され、ようやくマウスを利用したin vivo HCV感染系の目途が立ったものの、依然として効率的なHCV増幅系は開発されていない。以上の背景を踏まえ、本課題では、長鎖RNA発現系RNA polymerase I発現カセットを搭載したアデノウイルス(Ad)ベクターを作製し、HCV RNA genomeをキメラマウスの肝臓に直接導入する技術を創出することにより、in vivoにおいてHCVを効率的に増幅するシステムを確立することを最終目的としている。前年度までの検討で、HCV rep Luc(HCV複製をluciferase遺伝子発現で解析可能)を搭載したAdベクターの作製を試みたところ、ウイルス粒子を作製できなかった。そこで本年度は、まず発現制御型のAdベクターを開発した。次に、本ベクターにHCV rep Lucを搭載したところ、Adベクター粒子が産生され、本ベクター感染細胞ではluciferase発現が観察され、インターフェロン添加によりluciferase発現量は濃度依存的に低下した。以上現在までに、Adベクターを利用したHCV複製評価系の構築に成功している。今後は、本ベクターを用いて、HCV克服に向けて基礎研究および創薬研究を遂行してく予定である。