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歯周病原性細菌に感染したマクロファージアポトーシスの機序の解明

牙周病原菌感染巨噬细胞凋亡机制的阐明

基本信息

批准号：
07807177
负责人：
西原達次
金额：
$ 1.22万
依托单位：
国立予防衛生研究所
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1995
资助国家：
日本
起止时间：
1995 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

in vitroの培養系で歯周病原性グラム陰性嫌気性細菌をマウスマクロファージ細胞株に感染させる実験系の確立に成功した。そこで、感染マクロファージにおける細胞致死活性の発現をMTT試薬を持ち多アッセイ法とLDH活性を指標とする測定法で調べた。その結果、数種の歯周病原性細菌のなかで、若年性歯周炎の原因菌と考えられているActinobacillus actinomycetemcomitansが培養マクロファージに致死的に作用することが明らかとなった。A. actinomycetemcomitansがマクロファージに対して致死的に作用する際には、マクロファージ内にA. actinomycetemcomitansが取り込まれることが必須であることが、食作用を阻害する薬剤を用いた実験で確認された。さらに、マクロファージ内のプロテインキナーゼCが、A.actinomycetemcomitansによる致死活性発現に深く関与していることが明らかとなった。次に、A.actinomycetemcomitans感染マクロファージの致死活性発現のメカニズムについてアポトーシスの観点から検討した。A. actinomycetemcomitans感染マクロファージに見られた細胞死は、エンドヌクレアーゼの活性阻害剤であるアウリントリカルボン酸により完全に抑制された。感染マクロファージのDNAの断片化をアガロース電気泳動で解析したところ、アポトーシス特有のDNAの断片化が確認された。さらに、組織化学的手法を用いた病理組織学的観察の結果からも、A.actinomycetemcomitans感染マクロファージに見られた細胞死がアポトーシスによるものであることが支持された。これらの事実から、A.actinomycetemcomitans感染マクロファージに見られた細胞死がアポトーシスにより引き起こされていることが明らかとなった。以上、歯周病の発症と病態の進行において、歯周病原性細菌によるアポトーシス細胞死が重要な役割を果たしている可能性が今回の研究結果から強く示唆された。

The in vitro strain was confirmed to be successful because of its pathogenicity and sexual parasitosis. The cell lethal activity was detected by MTT assay. The LDH activity was measured by Elisa. The results of the test, several kinds of periodontal pathogenic bacteria, and the pathogenic bacteria of perinatal periodontitis were tested. The effect of Actinobacillus actinomycetemcomitans on the death of periodontitis was confirmed by Elisa. A. the effects of death caused by actinomycetemcomitans and actinomycetemcomitans must be confirmed by the use of food, food, and food. The lethal activity of C, A.actinomycetemcomitans, and so on, the lethal activity, and the lethal activity were detected. The lethal activity of A.actinomycetemcomitans infection was significantly higher than that of control group. A. actinomycetemcomitans infection caused cell death, and cell death. Infection is caused by DNA fragmentation and electrophoretic mobility analysis. DNA fragmentation is unique to the detection of DNA fragments. The methods of histopathology and histopathology were used to observe the results of histopathology, A.actinomycetemcomitans infection, cell death, histopathology, histopathology, histology and histopathology. The infection of A.actinomycetemcomitans was caused by the death of the cell, the death of the cell. The results of this study strongly indicate the possibility of cell death, cell death and cell death.