害虫制御を目指したホルモンによる昆虫機能発現機構の包括的解析

综合分析激素表达昆虫功能的害虫防治机制

• 批准号: 14656022
• 负责人: 松本 正吾
• 金额: $ 1.86万
• 依托单位: The Institute of Physical and Chemical Research
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 2003
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-14656022/
• 关键词: 昆虫機能発現; フェロモン腺; 平均化ライブラリー; カイコ; ペプチドホルモン; ジーンターゲッティング

昨年度に引き続き、神経ホルモンPBANにより制御されるカイコガ性フェロモン産生系をモデルとして、ホルモンによる昆虫機能発現の分子機構解析を試みた。すなわち、カイコ純系系統p50フェロモン腺の平均化cDNAライブラリーなどから浮き彫りにしたフェロモン腺特異的遺伝子の解析を行い、'フェロモン成分の種特異性を規定するキー酵素である不飽和化酵素(Ds1)およびアシル基還元酵素(pgFAR)の性質(基質特異性など)をまず明らかにした。次いで、これらのフェロモン生合成酵素遺伝子の異種生物での発現を試み、カイコガ性フェロモン(ボンビコール)を自ら産生する酵母の形質転換体の作製に成功した。これらの手法は植物などの異種生物にフェロモン生合成酵素遺伝子を導入・発現し、これをフィールドに用いることで標的ガ類の配偶行動を撹乱するという、新たな選択性の高い安定した害虫制御技術の開発に道を拓くものである。一方、機能発現に関わる昆虫遺伝子の機能を包括的に解析するツールとして、カイコでのジーンターゲッティング法の開発に向けた方法論の確立を試み、本年度は、Golicら(2000)によって開発された相同組み換えによるジーンターゲティング法を考慮し、カイコへの適用を開始した。現在、この手法の実施に必要なFLP部位特異的リコンビナーゼとI-SceIエンドヌクレアーゼ遺伝子を導入したトランスジェニックカイコの作成と、標的配列に相同なDNAから成るドナーコンストラクトの構築を進めているが、この最新の形質転換技術をカイコでの系に応用することはノックアウトカイコの作製を可能とするものである。

Yesterday's year's に cited き続き、神経ホルモンPBANによりcontrolされるカイコガ性フェロモン production system is the molecular structure analysis of をモデルとして and ホルモンによる insect function.すなわち, カイコ pure line system p50フェロモンden's averaged cDNA ライブラリーなどから Floating きsculpture りにしたフェロモン Gland-Specific Gland-Specific Relic Analysis を行い、'フェロモThe ingredient's species-specific properties are defined as the するキーzyme であるunsaturated enzyme (Ds1) およびアシル-based reductase (pgFAR) (matrix-specific など) をまず明らかにした. Sub-いで、これらのフェロモン生anasynthetic enzyme remnant of the heterogeneous organism The nature of the フェロモン(ボンビコール) is the success of the transformation of the body of the yeast into the self-produced one.これらのtechniqueはPlantなどのXenobioticsにフェロモン生anasynthetic enzyme legacy㼝子をIntroduction・発appearし、これをフィールドに用いることThe standard ガcategory mate action を撹乱するという, the new たなselection 択性の高い安全した开発に道を多くものである with pest control technology. On the one hand, the analysis of the function of the insect remnant and the function of the insect is revealed.て、カイコでのジーンターゲッティング法の开発に向けた MethodologyのEstablishmentをTrial み, this year は, Golic ら (2000) によって开発 された same group みChange the えによるジーンターゲティング法をconsider, カイコへのapply をstart した. Now, it is necessary to use FLP site-specific リコンビナーゼとI-SceIエンド in order to perform the technique. The ヌクレアーゼ弝子を imported into the したトランスジェニックカイコのと, and the target arrangement is the same. The latest form-matter transformation technology constructed by DNA から成るドナーコンストラクトのThe をカイコでの system is made with することはノックアウトカイコのをpossible とするものである.

项目成果

Ken'ichi Moto: "Pheromone gland-specific fatty-acyl reductase of the silkmoth, Bombyx mori"Proc.Natl.Acad.Sci.USA.. 100. 9156-9161 (2003)

Kenichi Moto：“蚕蛾的信息素腺特异性脂肪酰基还原酶，Bombyx mori”Proc.Natl.Acad.Sci.USA.. 100. 9156-9161 (2003)

Shogo Matsumoto: "Chemical characterization of cytoplasmic lipid droplets in the pheromone-producing cells of the silkmoth, Bombyx mori.)"Insect Biochemistry and Molecular Biology. 32. 1447-1455 (2002)

Shogo Matsumoto：“蚕蛾（Bombyx mori）产生信息素的细胞中细胞质脂滴的化学特征。）”昆虫生物化学和分子生物学。

Ken'ichi Moto: "Cell-specific expression of enhanced green fluorescence protein under the control of neuropeptide gene promoters in the brain of the silkworm, Bombyx mori, using Bombyx mori nucleopolyhedrovirus-derived vectors"Insect Biochemistry and Mole

Kenichi Moto：“使用家蚕核多角体病毒衍生载体，在家蚕大脑中神经肽基因启动子的控制下增强绿色荧光蛋白的细胞特异性表达”昆虫生物化学和鼹鼠

Toshihiro Nagamine: "Functional characterization of bacterial signal peptide ompA in a bacurovirus-mediated expression system"Cell Struct.Function. 28. 131-142 (2003)

Toshihiro Nagamine：“杆状病毒介导的表达系统中细菌信号肽 ompA 的功能表征”细胞结构。功能。

Norihiro Yokoyama: "Ultrastructural studies on the pheromone-producing cells in the silkmoth, Bombyx mori : formation of cytoplasmic lipid droplets before adult eclosion"Acta Biologica. 54. 299-311 (2003)

Norihiro Yokoyama：“对蚕蛾（Bombyx mori）中信息素产生细胞的超微结构研究：成虫羽化前细胞质脂滴的形成”Acta Biologica。