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糸状菌に特異的なオルガネラであるオロニン小体の機能解析

Oronin 体（丝状真菌特有的细胞器）的功能分析

基本信息

批准号：
14656034
负责人：
北本勝ひこ
金额：
$ 2.18万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2002
资助国家：
日本
起止时间：
2002 至 2003
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-14656034/
关键词：
麹菌糸状菌オロニン小体隔溶菌ペルオキシソーム隔壁孔

项目摘要

糸状菌は、連続した細胞からなる微生物であり、隔壁には細胞質が連絡できる孔が存在する。オロニン小体は糸状菌に特異的なオルガネラであり、連続した細胞間の隔壁孔の近傍に存在する電子密度の高い球状の形態として観察される。本研究は分子レベルでオロニン小体の機能およびその動態制御を解析しようとするものである。オロニン小体はペルオキシソームの一形態とも推定されているので、この点について分子レベルで解析することは興味深いと思われる。これまでに、麹菌A.oryzaeから、オロニン小体を構成するタンパク質をコードするhexA遺伝子を単離したところ、C末端にペルオキシソーム局在配列を有していた。昨年度は、取得したhexA遺伝子破壊株でオロニン小体が消失したのを確認した。今年度は、溶菌条件の検討のなかで、寒天培地に生育させたA.oryzaeの菌体に水をかけると、先端細胞から細胞質が吹き出して溶菌する現象を発見した。溶菌した先端細胞に隣接する2番目の細胞を観察したところ、野生株では隔壁を境に溶菌の伝播が防がれたものの、hexA遺伝子破壊株では2番目の細胞も溶菌していた。一方で、HexAの局在については赤色蛍光タンパク質DsRed2で、隔壁については緑色蛍光タンパク質EGFPを融合した分泌タンパク質で、2重で可視化した。共焦点レーザー顕微鏡で取得した像を三次元構築したところ、溶菌細胞に隣接する隔壁孔にあたる部分にHexAの局在が確認された。これらの結果から、HexAが菌糸損傷時に隔壁孔をふさぎ、溶菌の伝播を防ぐことを、細胞レベルで直接示すことに成功した。また、HexAアミノ酸配列にカルモジュリン結合配列を発見し、in Vitroでの結合を確認した。これは、HexAの溶菌制御機構を探るうえで興味深い知見である。

Bacteria, microbes, microbes, There is a high density of electrons, a high density of electrons, a spherical shape, and a close proximity to the pores in the intercellular walls of the microorganisms, such as small bodies and microorganisms. In this study, the molecular mechanism is used to analyze the dynamic control of the body. The body, the body and the body. The bodies of the bacteria A.oryzae, the bacteria, and the corpuscles are divided into two parts: the bacteria, the bacteria, the body, the body and the body. Last year, we got the news that the hexA plant was broken and the corpuscles disappeared. This year, the conditions of bacteriolysis, the conditions of bacteriolysis, the fertility of A.oryzae, the bacteria of water, the cells of the top, the bacteriolysis, the bacteriolysis, the bacteriolysis. The bacteriolytic bacteria were isolated from the tip of the bacteria, followed by two orders of bacteria, the wild strains, the next door, the bacteria, the bacteria, the hexA, the bacteria, the bacteria. One side, the HexA Bureau, the red light, the DsRed2, the next door, the color, the EGFP, the fusion, the secretion, the light, the light, the red light, the red light, the red The confocal micrograph obtains the image of the third dimension, the bacteriolysis cell, the septum, the part of the HexA, in the confirmation section. The results of the test results, the test results of the HexA bacteria system, the test results of the septal hole, the bacteriolytic agent, and the cell culture test directly indicate the success of the test. The combination of HexA and in Vitro is used to confirm the accuracy of the information. The imperial organ of the bacteriolytic system of the HexA fungus has a deep taste and knows the truth.