イソギンチャクのEGF様ペプチド毒の構造活性相関および遺伝子構造

海葵EGF样肽毒素的构效关系及基因结构

• 批准号: 14656081
• 负责人: 塩見 一雄
• 金额: $ 2.43万
• 依托单位: 東京水産大学
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 2003
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-14656081/
• 关键词: ハタゴイソギンチャク; gigantoxin; EGF; ペプチド毒; cDNAクローニング; イソギンチャク; 遺伝子

1.ハタゴイソギンチャクの3成分のペプチド毒(EGF様ペプチド毒:gigantoxin I、タイプ1のNaチャンネル毒:gigantoxin II、タイプ2のNaチャンネル毒:III)について、3'RACEおよび5'RACEによりcDNAをクローニングし、全塩基配列を決定した。いずれのペプチド毒もその前駆体はシグナルペプチド、プロパート部および成熟ペプチドで構成されていた。また、各ペプチド毒は刺胞に存存することを確認し、プロパート部は刺胞へのsortingに必要な部分であると推定した。2.gigantoxin Iの遺伝子構造を解析し、シグナルペプチドの中間にイントロンを確認した。なお、哺乳類由来のEGFの前駆体は特有の繰り返し構造を有するが、gigantoxin Iの場合には繰り返し構造はみられず、遺伝子構造は異なることが判明した。3.25種イソギンチャクの拙出液についてA431細胞の形態に及ぼす効果を検索したところ、数種イソギンチャクに細胞毒性が認められたがEGF様活性はいずれも陰性であった。しかし、イボハタゴイソギンチャク、シマキッカイソギンチャク、センジュイソギンチャクからgigantoxin I同様にサワガニに対して一過性の麻痺を引き起こすペプチド毒を単離し、アミノ酸配列分析から新規ペプチド毒であることを明らかにした。4.gigantoxin Iは、シナプトソームを用いた競合試験により各種イオンチャンネルやアセチルコリンレセプターに対するブロッカーではないと判断され、さらにアセチルコリンとの結合能およびコリンエステラーゼ活性も示さなかった。また、gigantoxin Iを大腸菌で発現させたが生物活性を確認できなかった。gigantoxin Iの毒性発現機構、構造活性相関は今後の課題として残された。

1. There are three components (EGF, Na, gigantoxin II, Na, III), 3 'Race, 5' Race, cDNA, and all base lines. In front of the body, there is no poison in the body, and the body is in front of the body. The stabbing cells are stored in the following parts: confirmation, sorting, necessary, presumption, etc. The 2.gigantoxin I computer system is used to analyze and verify the data in the middle of the system. The origins of mammals and mammals are unique to EGF precursors, which are used in the production of cancer, gigantoxin I, and gigantoxin I, as well as in the production of medical equipment. 3.25 the cell morphology of A431 cells was detected by Elisa. There were several kinds of cell toxicity tests, cell toxicity tests, EGF activity tests, cell toxicity tests and so on. In the first place, there was an increase in the number of drugs, the temperature, the temperature and the temperature. The combination of 4.gigantoxin I and CAE equipment can be used to show the activity of all kinds of equipment in the market. The biological activity was confirmed by gigantoxin I, E. coli and E. coli. The toxicity mechanism and activity of gigantoxin I are related to each other in the future.

项目成果

Tomohiro Honma: "Molecular cloning of an epidermal growth factor-like toxin and two sodium channel toxins from the sea anemone Stichodactyla gigantea"Biochim.Biophys.Acta. 1652. 103-106 (2003)

Tomohiro Honma：“来自海葵 Stichodactyla gigantea 的表皮生长因子样毒素和两种钠通道毒素的分子克隆”Biochim.Biophys.Acta。

Kazuo Shiomi: "An epidermal growth factor-like peptide toxin and two sodium channel toxins from the sea anemone Stichodactyla gigantea."Toxicon. 41(2). 229-236 (2003)

Kazuo Shiomi：“来自海葵 Stichodactyla gigantea 的一种表皮生长因子样肽毒素和两种钠通道毒素。”Toxicon。