成体の脳室下細胞と脈絡叢上衣細胞より神経幹細胞を樹立する

从成人室下细胞和脉络丛室管膜细胞建立神经干细胞

• 批准号: 14657004
• 负责人: 井出 千束
• 金额: $ 2.11万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-14657004/
• 关键词: 神経幹細胞; 脳室下組織; 脈絡叢; 成体ラット; 死体; 細胞塊(neurosphere); セルソーター; 移植

(1)脳室下組織からの幹細胞の樹立これまでの幹細胞の樹立は主に胎児あるいは生後間も無い若い動物の脳からであった。本研究では、死後の成体の脳室下組織から幹細胞の樹立が可能かどうかを調べた。成体及び若年(生後1〜7日)のラットを用いた。動物を過剰な麻酔で殺し、冷蔵庫で1-6日保存した。成体では側脳室外側部(線状体側)の脳室下組織を、若年ラットでは脳組織全体をソースとして用いた。驚くべきことに、死後2日迄のラットからは生体の場合と同様の収率で細胞塊(neurosphere)が得られた。当然のことながら、若年ラットからは成体の場合よりも多くの細胞塊が得られた。成体では死後4日まで、若年では死後6日まで少数ながら細胞塊が得られた。細胞塊からはの細胞分化の様式は、死体から得られたも生体からの場合と全く同じであった。死体から得られた細胞塊を脊髄に移植すると細胞は良く生着した。このように死体からの幹細胞も生体と同様の増殖分化能を持っていることが明かとなった。これは神経幹細胞の臨床的な応用というで大きな意義がある。(2)脈絡叢上衣細胞からの神経幹細胞の樹立脈絡層は成体ラットと生後7日のラットを用いた。脈絡叢上衣細胞にはBrdUの取り込みが見られるので、成体でも分裂する細胞であることが分る。この組織から神経幹細胞がとれるかどうかを調べた。まず、細胞の標識のために脈絡叢そのものを抗原としてモノクローン抗体を作製した。得られた抗体の中から脈絡叢上衣細胞を特異的に認識する抗体を選んで、蛍光色素を結合させて脈絡叢の上衣細胞を標識した。標識された細胞をセルソーターで分離し、細胞培養系に移して、幹細胞としての性質つまり細胞塊(neurospphere)を作る性質があるかどうかを調べた。少数ではあるが、細胞塊が形成されることが明かとなった。この結果は脈絡叢の上衣細胞の中に幹細胞の性質をもつ細胞があることを示すものである。

(1)The stem cells were established in the lower part of the body. The stem cells were established in the lower part of the body. In this study, stem cell establishment in adult tissues after death may be regulated. Adults and young adults (1 ~ 7 days after birth) are used in the middle of the year. Animals are kept in cold storage for 1-6 days. In adults, the lower part of the chamber (linear body side) is divided into two parts: the upper part and the lower part. In case of death, two days after death, the cell mass (neurosphere) is obtained. Of course, if you want to grow up, you have to grow up. 4 days after adult death, 6 days after adult death, a few cells are obtained. The cell mass is divided into two parts: the dead body and the living body. The cells were transplanted from the dead body. The stem cells and cells of the same species can be differentiated and maintained. The clinical significance of neural stem cells is discussed. (2)Choroid plexus cells are used to establish the choroid layer of neural stem cells. Choroid plexus cells are divided into two groups: adult cells and adult cells. This tissue contains neural stem cells. Antigens and antibodies to cell markers in the choroid plexus Antibody selection, pigment binding, and identification of choroid plexus jacket cells are identified in the antibody. Identification of stem cells, isolation of cell culture systems, properties of stem cells, and properties of cell blocks (neurospheres) A small number of, cell mass The result is that the cells in the choroid plexus have the same properties as the stem cells.

项目成果

Bai, H., Suzuki, Y.et al.: "Dissemination and proliferation of neural stem cells on the spinal cord by injection into the fourth ventricle of the rat"Journal of Neuroscience Method. (in press). (2003)

Bai, H., Suzuki, Y.等人：“通过注射到大鼠第四脑室中神经干细胞在脊髓上的传播和增殖”《神经科学方法杂志》。

井手千束: "総説:脊髄の再生 (2)臨床脳波 44巻2号"永井書店. 7 (2002)

井出千冢：“评论：脊髓再生（2）临床脑电图第44卷第2期”永井书店7（2002年）。

Taketomi, M., Kinoshita, et al.: "Nogo-A expression in mature oligodendrocytes of rats spinal cord in association with specific molecules"Neuroscience Letters. (in press). (2003)

Taketomi，M.，Kinoshita 等人：“大鼠脊髓成熟少突胶质细胞中 Nogo-A 的表达与特定分子相关”《神经科学快报》。

Wu S, Suzuki Y, et al.: "Immunohistochemical and electron microscopic study of invasion and differentiation in spinal cord lesion of neural stem cells grafted through"Journal of Neuroscience Research. 69. 940-945 (2002)

Wu S，Suzuki Y，等：“移植神经干细胞在脊髓病变中的侵袭和分化的免疫组织化学和电子显微镜研究”，神经科学研究杂志。

Wu, S., Suzuki, Y.et al.: "Bone marrow stromal cells enhance differentiation of co-cultured neurosphere cells and promote regeneration of injured spinal cord"Journal of Neuroscience Research. (in press). (2003)

Wu, S., Suzuki, Y.等人：“骨髓基质细胞增强共培养神经球细胞的分化并促进受损脊髓的再生”神经科学研究杂志。