新規癌転移関連分子Mlzeの機能解析-消化器癌の転移における役割-

新型癌症转移相关分子Mlze的功能分析 - 在胃肠道癌症转移中的作用 -

• 批准号: 14657131
• 负责人: 篠村 恭久
• 金额: $ 1.92万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 2003
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-14657131/
• 关键词: 転移; 大腸癌; 悪性黒色腫; HGF; EGF; 胃癌

マウス悪性黒色腫の転移能の高い細胞株から単離した新規遺伝子MLZEは悪性黒色腫ばかりでなく消化器由来の癌細胞株でも発現する。大腸腺腫、木腸癌および肝転移巣でのこの遺伝子の発現を検訂した結果、この遺伝子が大腸腺腫では発現せず大腸癌とその転移巣で発現していることを明らかにした。MLZEの機能を明らかにする目的でMLZE遺伝子をラット腸管上皮由来の細胞株IEC6細胞に遺伝子導入して細胞形態、増殖能、運動能を検討した。その結果、MLZE遺伝子導入細胞株は運動能が亢進することが明らかになった。細胞運動を亢進させる機序を明らかにするため、消化管上皮細胞の運動能を高める因子であるHGFおよびEGFによってMLZEが活性化されるかどうかをIEC6細胞において検討した。HGFおよびEGFの刺激はMLZE発現量を変化させなかった。MLZE蛋白は細胞質全体のびまん性に分布するが、GFP融合MLZE蛋白を強制発現した細胞においてHGFおよびEGFの刺激は融合蛋白の核内移行を惹起させなかった。したがって、MLZEはHGFおよびEGFによる運動能の亢進には関与しないと考えられた。MLZEはロイシンジッパー構造を持ち、ここを介して他の分子と結合する可能性がある。そこで、免疫沈降で結合相手の同定を試みた。MLZEを発現する細胞株3種の細胞抽出液を抗MLZE抗体で免疫沈降して電気泳動したが、3つの細胞株で共通するバンドは得られなかった。次にMLZEが生体内で癌細胞の転移能を亢進させる働きがあるかどうかをマウス転移モデルで検討した。MLZE発現量の少ない低転移性悪性黒色腫細胞株F10にMLZE遺伝子を導入して高発現株を作成し、これをマウス皮下に接種して肺転移能を調べたが、転移能に変化を認めなかった。

A new gene MLZE was developed from a new cell line derived from the digestive organ of a black tumor. Colorectal cancer, colorectal cancer and liver metastasis are the main causes of this disease. To clarify the function of MLZE, we investigated the expression of MLZE gene in IEC6 cells, a cell line derived from intestinal epithelium, and its cell morphology, reproductive activity, and motor activity. As a result, MLZE gene was introduced into the cell line and the motor activity was increased. The mechanism of cell motility is clear, and the motility of digestive tract epithelial cells is high. The factors of HGF and EGF are activated. HGF and EGF stimulate MLZE production. MLZE protein is distributed throughout the cytoplasm, and GFP fusion MLZE protein is produced under stress in cells, and HGF and EGF stimulate the migration of fusion protein into the nucleus. HGF and EGF are related to the increase of exercise energy. MLZE has the potential to combine with other molecules.そこで、免疫沉降で结合相手の同定を试みた。The cell extracts of the three cell lines from which MLZE was developed showed anti-MLZE antibodies, which were used for immunoprecipitation, and the three cell lines were used for immunoprecipitation In addition, MLZE can stimulate the migration of cancer cells in vivo. The MLZE gene was introduced into a highly developed cell line F10 with a low level of MLZE production, and then subcutaneously inoculated into a cell line F10 with a low level of MLZE production.

项目成果

H.Chen et al.: "Polyclonal nature of diffuse proliferation of interstitial cells of Cajal in patients with familial and multiple gastrointestinal stromal tumours"Gut. 51(6). 793-796 (2002)

H.Chen 等人：“家族性和多发性胃肠道间质瘤患者中 Cajal 间质细胞弥漫性增殖的多克隆性质”Gut。

M.Ogasa, et al.: "Gastrin activates nuclear factor kappaB through a protein kinase C dependent pathway involving NFkappaB inducing kinase, inhibitor kappaB kinase, and tumour necrosis factor receptor associated factor 6 in MKN-28 cells transfected with ga

M.Ogasa 等人：“在转染 ga 的 MKN-28 细胞中，胃泌素通过蛋白激酶 C 依赖性途径激活核因子 kappaB，该途径涉及 NFkappaB 诱导激酶、抑制剂 kappaB 激酶和肿瘤坏死因子受体相关因子 6。

M.Toyota et al.: "Gastrin activates NF-kB through a protein kinase C-dependent pathway involving NF-kB-inducing kinase, IkB kinase and TRF6 in MKN-28 cells transected with gastrin receptor"Gut. (in press). (2003)

M.Toyota 等人：“胃泌素通过蛋白激酶 C 依赖性途径激活 NF-kB，该途径涉及用胃泌素受体横切的 MKN-28 细胞中的 NF-kB 诱导激酶、IkB 激酶和 TRF6”Gut。

K.Kinoshita, et al.: "Endoscopic ultrasonography-guided fine needle aspiration biopsy in follow-up patients with gastrointestinal stromal tumours"Eur J Gastroenterol Hepatol. 15(11). 1189-1193 (2003)

K.Kinoshita 等人：“在胃肠道间质瘤随访患者中进行超声内镜引导的细针抽吸活检”Eur J Gastroenterol Hepatol。

M.Nakahara et al.: "Dose-dependent and time-limited proliferation of cultured murine interstitial cells of Cajal in response to stem cell facter"Life Sciences. 70(20). 2367-2376 (2002)

M.Nakahara 等人：“培养的 Cajal 鼠间质细胞响应干细胞因子的剂量依赖性和时间限制的增殖”生命科学。