子宮内胎児発育不全モデルラットを用いた中枢神経障害の分子生物学的研究

利用宫内生长受限大鼠模型进行中枢神经系统疾病的分子生物学研究

• 批准号: 14657259
• 负责人: 早川 昌弘
• 金额: $ 1.92万
• 依托单位: Nagoya University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 2004
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-14657259/
• 关键词: 子宮内胎児発育不全; 低酸素性虚血性脳症; 低酸素性虚血性ストレス; 中枢神経障害

【研究の目的】子官内発育遅延モデルラットを用いて、低酸素性虚血ストレスを負荷し、脳の梗塞面積について検討した。更にTTC染色とHE染色の所見を比較検討した。【方法】子宮内発育遅延モデル(IUGR)動物の作成:SD系ラット母獣の腹腔内に、妊娠13日目に浸透圧ポンプを埋め込み合成トロンボキサンA2を20ng/hrで持続投与し、胎児に子宮内発育遅延を誘導した。自然分娩にて出生後、体重を測定し子宮内発育遅延動物であることを確認した。低酸素性虚血性ストレスの負荷:日令7の正常体重(コントロール)ラットとIUGRラット新生仔を、笑気+フローセン吸入麻酔下にて右総頸動脈を絹糸にて結紮した。3時間母獣に戻し回復させた後、8%酸素を2時間吸入させた。IUGRラットについては、結紮のみをおこなったもの、低酸素負荷のみをかけたものについても検討を行った。TTC染色:2の処置後、48時間後にペントバルビタールで全身麻酔をかけた後、冷生食で環流し大脳を摘出した。2mm毎に脳のスライスを作成し、1.0%TTC液にて20分染色を行った。冷10%中性ホルマリン液にて固定保存した。結果の解析:TTC染色では正常の組織は赤色に染色され、梗塞域は白くなる。赤色、白色の部位をNIH imageソフトを用いて計測し、右大脳半球の面積・梗塞面積を測定し、その比率を計算した。【結果】梗塞を起こした割合:コントロール群で5/50(50%)、IUGR(RCA結紮+低酸素)で5/16(31%)、IUGR(RCA結紮のみ)では0/4(0%)、IUGR(低酸素のみ)では0/4(0%)であった。コントロール群4匹および子宮内発育遅延群5匹に、生じた梗塞に関して比較検討した。コントロール群は26.22±14.28%、子宮内発育遅延群28.78±12.86%であった。2群間では統計学的に有意差を認めなかった。(p=0.7844)海馬CAI領域では、HE染色では神経細胞の脱落、壊死を認めたが、TCC染色では病巣として描出できなかった。【考察と結論】今回の結果は、有意差は得られなかったが、IUGR群で強い受傷があったことが示され、IUGR児の中枢神経脆弱性を示唆していると考えられた。

[Objective] To investigate the effects of hypoacidity on the development of renal failure and infarct size. The results of TTC staining and HE staining were compared. [Methods] In utero development delay (IUGR) animals were established:SD system was established by intraperitoneal injection of SD, 13 days of gestation, and 20ng/hr of SD. After birth, the weight of the animal was determined. Hypoallergenic hypoallergenic hypo 3 hours to recover, 8% to inhale IUGR TTC staining:2 days after treatment, 48 hours after treatment, cold raw food, large ocean currents, and so on. 2mm each color, 1.0% TTC solution for 20 minutes. Cold 10% neutral solution for fixation Results Analysis:TTC staining is normal tissue, red staining is normal tissue, infarct area is white tissue. Red and white parts of NIH image measurement, right hemisphere area, infarct area measurement, calculation of the ratio [Results] Occlusion onset: 5/50(50%), IUGR(RCA ligation + hypoacid) 5/16(31%), IUGR (RCA ligation) 0/4(0%), IUGR(hypoacid) 0/4(0%). The number of women in the womb is 4, and the number of women in the womb is 5. The number of women in the womb is 4, and the number of women in the womb is 5. The number of women in the womb is 4. 26.22±14.28% of female embryos and 28.78±12.86% of female embryos. 2. Statistical differences between groups. (p=0.7844) CA1 area of hippocampus was stained with HE and TCC. [Conclusion] The results of this study show that IUGR group has strong injury and central nervous system vulnerability.

项目成果

Hayakawa M, Kato Y, Takahashi R, Tauchi N.: "A Case of Citrullinemia Diagnosed by DNA Analysis: Included prenatal genetic diagnosis from amniocyte of next pregnancy"Pediatrics International. (in press). (2003)

Hayakawa M、Kato Y、Takahashi R、Tauchi N.：“通过 DNA 分析诊断瓜氨酸血症的一例：包括下一次妊娠的羊水细胞的产前基因诊断”国际儿科。

Hayakawa M, Okumura A, Hayakawa F, Kato Y, Ohshiro M, Tauchi N, Watanabe K.: "Nutritional State and Growth and Functional Maturation of the Brain in Extremely Low Birth Weight Infants"Pediatrics. (in press). (2003)

Hayakawa M、Okumura A、Hayakawa F、Kato Y、Ohshiro M、Tauchi N、Watanabe K.：“极低出生体重婴儿大脑的营养状态、生长和功能成熟”儿科。

Yasuda A, Kimura H, Hayakawa M, Ohshiro M, Kato Y, Matsuura O, Suzuki C, Morishima T: "Evaluation of cytomegalovirus infections transmitted via breast milk in preterm infants with a real polymerase chain reaction assay"Pediatrics. 111. 1333-1336 (2003)

Yasuda A、Kimura H、Hayakawa M、Ohshiro M、Kato Y、Matsuura O、Suzuki C、Morishima T：“通过真实聚合酶链反应测定评估早产儿通过母乳传播的巨细胞病毒感染”儿科。

Evaluation of systemic inflammatory responses in neonates with herpes simplex virus infection

单纯疱疹病毒感染新生儿全身炎症反应的评价

• 发表时间: 2004
• 期刊: Journal of Infectious Disease 190
• 作者: Kawada;J.;Kimura;H.;Ito;Y.;Ando;Y.;Tanaka-Kitajima;N.;Hayakawa;M.;Nunoi;H.;Endo;F.;Morishima;T
• 通讯作者: T

Hayakawa M, Kato Y, Takahashi R, Tauchi N: "Case of citrullinemia diagnosed by DNA analysis : including prenatal genetic diagnosis from amniocytes of next pregnancy"Pediatric International. 45. 196-198 (2003)

Hayakawa M、Kato Y、Takahashi R、Tauchi N：“通过 DNA 分析诊断瓜氨酸血症的病例：包括下一次妊娠的羊水细胞的产前基因诊断”国际儿科。