遺伝子導入表皮角化細胞を介したケロイド発生制御機構の解明とその臨床応用

转基因表皮角质形成细胞调控瘢痕疙瘩发生的机制阐明及其临床应用

• 批准号: 14657456
• 负责人: 山本 有平
• 金额: $ 1.02万
• 依托单位: Hokkaido University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 2003
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-14657456/
• 关键词: ケロイド; アポトーシス; 表皮角化細胞; 線維芽細胞; 共培養; TGF-β

我々はこれまでに、ケロイドの成立におけるアポトーシス耐性の一因として、ケロイド由来線維芽細胞自身の内因性TGF-β1の存在を明らかにしている。このTGF-β1をコントロールすることができれば創傷治癒過程の過剰な瘢痕を克服できると考え、また表皮角化細胞より産生されるサイトカインがケロイド組織内の線維芽細胞の増殖やアポトーシスの制御に関与していると推測した。今回、インフォームドコンセントの得られた手術検体より採取した正常およびケロイド組織から表皮角化細胞、線維芽細胞の培養を行った。上下2チャンバーになっている6穴プレートを使用し、上部に正常線維芽細胞によるfeeder layer、および表皮角化細胞を、下部に線維芽細胞を種々の組み合わせで播種することにより共培養系を確立し、正常皮膚由来表皮角化細胞あるいはケロイド由来表皮角化細胞との共培養下における正常皮膚およびケロイドの線維芽細胞の増殖とアポトーシス抵抗性について検討した。この結果、ケロイド由来表皮角化細胞と共培養した線維芽細胞で最も高い細胞増殖率を認め、かつ血清除去下で共培養を行いアポトーシスを誘導すると高いアポトーシス抵抗性を示した。また、アポトーシスに関連するMAPKカスケードの下流に位置するERK,JUNKのリン酸化およびアポトーシス関連タンパク(Fas/FasL,Bcl-2,TGF-β)の発現の解析においても、ケロイド由来表皮角化細胞と共培養した線維芽細胞で、最も高い発現を認めた。以上より、ケロイド表皮は正常表皮に比べ共培養下のケロイド由来線維芽細胞の増殖およびアポトーシス耐性に強い影響を持つことが明らかになった。

One of the reasons for this is that there is endogenous TGF-β1 in the cells themselves. The expression of TGF-β1 is related to the process of wound healing and the process of scar overcoming. It is speculated that the proliferation and control of epidermal keratinocytes in wound healing tissues are related to the production of epidermal keratinocytes. The culture of epidermal keratinocytes and vascular buds was carried out in normal and normal tissues. The upper and lower parts of the feeder layer of normal line cells, epidermal keratinocytes and lower line cells were used to establish a co-culture system. Normal skin-derived keratinocytes and normal skin-derived keratinocytes co-cultured with normal skin-derived keratinocytes The results showed that co-culture of keratinocytes from epidermis had the highest cell proliferation rate, and co-culture of keratinocytes without serum had the highest cell resistance. The analysis of the expression of MAPK protein (Fas/FasL,Bcl-2,TGF-β) at the downstream position of ERK, JAKP protein and MAPK protein (Fas/FasL,Bcl-2,TGF-β) was carried out. The above results showed that the growth and tolerance of cell in vitro were significantly affected by the growth and development of cell in vitro compared with that in normal epidermis.

项目成果

Funayama E: "Keratinocytes promote proliferation and inhibit apoptosis of the underlying fibroblasts"J Invest Dermatol. 121・6. 1326-1331 (2003)

Funayama E：“角质形成细胞促进增殖并抑制潜在成纤维细胞的凋亡”J Invest Dermatol 121・6（2003）。