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皮質ローカルサーキットの解明と構成シナプス・ナノ構造解析の試み

尝试阐明皮质局部电路并分析突触纳米结构的组成部分

基本信息

批准号：
15650066
负责人：
遠山稿二郎
金额：
$ 2.18万
依托单位：
Iwate Medical University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2003
资助国家：
日本
起止时间：
2003 至 2005
项目状态：
已结题

项目摘要

本年度が最終年度であるので、3年間を通した主要成果および今後の展望について総合的に報告する。ブタコロナウイスル(HEV)のトレーサーとしての有用性の検討と使用条件の確立。ラットの実験系で、主に逆行性トレーサーであることを確認した。また使用濃度は従来のウイルストレーサーに比較し格段に低いPFU(数PFU:脳内投与)で十分目的を達成できることを明らかにした【Bai, et al.北米神経科学学会発表,2005】。さらに、細胞障害性が従来のものと比べ、非常に低いことも電子顕微鏡による検索で明らかになった。加えて、本ウイルスの感染、複製過程の一部を微小形態学的に明らかにした。上記、諸条件のもと皮質機能単位と考えられる大脳皮質聴覚領域での細胞集団の可視化に成功した。一方、サブナノ解析に必要な中枢神経組織標本作成の液体ヘリウム急速凍結条件および、凍結超薄切・免疫電顕法の神経組織への応用法【Akagi. et al J.Neurosci.Method,2006】を確立することができた。さらに、シナプス、node of Ranvier等の三次元的ナノ解析の基本となる電顕トモグラティー条件について、これまでのDynamic Shell Model法再構成処理に比べ、Topography Based Reconstruction (TBR)法再構成処理が最適であるとの結論に達した。本年度、私学助成金を得て、本学にTBR法可能な電子顕微鏡が導入されているので、今後、具体的データの取得にあたりたい。新しい手法であるCryo-SEMによる三次元解析の有用性を示すことができた【Nakatomi. et al. Brain Res.Protocol,2006】。以上の成果を基に、さらに具体的成果に発展させるため、ウイルス分野の専門家を増強し、新たに脂質・糖鎖解析の専門家を加え、基盤研究(A)で「皮質機能カラムの細胞構築を可視化できる経シナプス・ウイルストレーサーの開発」を申請中である【代表:遠山稿二郎】。

が finally this year's annual であるのでを tong, 3 years した main achievements およびの future について総に report of する. Youdaoplaceholder0 スス検 (HEV) トレトレササとててて <s:1> usefulness <e:1> 検 seek と conditions of use <e:1> are established. Youdaoplaceholder0 <s:1> empirical で, principal に retrograde トレ, サ, である, とをとを confirm たた. また use concentration は従 to のウイルストレーサーに compare し lattice period of low にい PFU (and) for several PFU: 脳で very purpose を reached できることを Ming らかにした [Bai, et al. North m god 経 science society 発 table, 2005]. さらに, cell handicap of が従 to のものと than べ, very low にいことも electronic 顕 micromirror による検 cable で Ming らかになった. Add えて, this ウスススス <s:1> infection and replication process <e:1> a を micromorphology に description らににたたた. Is written, the condition のもと cortex function 単 a と exam えられる big 脳 cortical hearing field での cells sets 団の visualization に successful した. Party, サブナノ parsing にな central god 経 tissue specimens made necessary の liquid ヘリウム quick freezing conditions および, freezing, ultra-thin cutting immune 顕 Method, の god 経 organization への応 usage [Akagi. Et al j. eurosci. Method, 2006] を establish することができた. さらに, シナプス, the node of Ranvier の such as three dimensional ナノ parsing の basic となる electric 顕トモグラティー conditions について, これまでの Dynamic Shell Model and then constitute 処に than べ, Topography -based Reconstruction (TBR) method reconstruction processing が optimal であると <s:1> conclusion に reaches た. Into gold, establishes this year をて, this study に TBR may な electronic 顕 micromirror が import されているので, in the future, the specific データの obtain にあたりたい. The new <s:1> technique であるCryo-SEMによる three-dimensional analysis <s:1> usefulness を shows すたとがでたたたたた [Nakatomi. et al. Brain Res.Protocol,2006]. All above のをに, さらに concrete results に発 exhibition させるため, ウイルス eset の専 door を raised strong し, new たに lipid, sugar lock parsing の専 door をえ, base plate research (A) で "cortex function カラムの cells build を visualization できる経シナプス · ウイルストレーサーの発" を application である【 represent: distant mountains "Er Lang.