骨コラ-ゲン分解におけるカテプシンLの役割

组织蛋白酶 L 在骨胶原降解中的作用

• 批准号: 03807015
• 负责人: 唐渡 孝枝
• 金额: $ 1.15万
• 依托单位: The University of Tokushima
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1991
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1991 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-03807015/
• 关键词: カテプシンL; 骨吸収; システインプロテア-ゼ; システインプロテア-ゼ阻害剤; コラ-ゲン; カテプシンB; カテプシンH

骨吸収現象は、破骨細胞の波状縁部で見られ、ここで石灰化組織を構成するミネラルの脱灰と有機物の消化吸収が起こる。この骨吸収に破骨細胞に含まれる加水分解酵素の関与が示されている。我々はカテプシン群に特異性のある阻害剤Eー64誘導体と備品であるフラクションコレクタ-を使用して精製したカテプシンLで作成した抗体を使用し、骨におけるカテプシン群の動態と骨コラ-ゲン分解に基づく骨組織崩壊の関係を明らかにし、特に大きく関与すると思われるカテプシンの種類の特定を試みた。低カルシウム食餌による実験的骨粗鬆症ラットでは、大腿骨重量は減少し、血中ハイドロキプロリン量が増加する。これにEー64aを4〜8mg/100g body weight腹腔内投与すると血中カルシウム及び血中ハイドロキシプロリンレベルも低下した。この場合、大腿骨抽出物のカテプシンB,H,Lは著明に抑制されているが、コラ-ゲナ-ゼ活性は抑制されていない。この結果はコラ-ゲン分解能をもつカテプシンのいずれかが関与していることを示唆している。この関与していると思われるプロテア-ゼを特定するために、カテプシンB,H,Lの分別が可能な新しいEー64誘導体の開発を試み、カテプシンBの阻害に特異的な誘導体の開発に成功した。この新しいEー64誘導体(CAー074)は8mg/100g/body weight腹腔内投与にって、大腿骨抽出物及び肝中カテプシンB活性を十分に抑制するがH,L活性には全く影響を与えない。またこの条件下での血中カルシウムレベルは全く低下が見られなかった。それ故、骨吸収にはカテプシンB以外のシステインプロテア-ゼ、特にコラ-ゲン分解活性の強いカテプシンLの関与が考えられ、その作用機構の解明と特異的な阻害剤作成は骨吸収の良い治療薬開発になると考え研究を進めている。

Bone resorption is a phenomenon in which osteoclast undulations are observed, calcified tissues are formed, and organic matter is digested and absorbed. The osteoclast cells in the bone resorption cells contain the relevant hydrolytic enzymes and the related enzymes. The specific resistance agent E 64 of the antibody is used to refine and prepare the antibody. The specific resistance agent E 64 of the antibody is used to clarify the relationship between the dynamics of the antibody group and the breakdown of the bone tissue. The weight of thigh bone decreased and the amount of blood increased due to osteoporosis. E-64a 4 ~ 8mg/100g body weight intraperitoneal injection and blood in the middle of the body and blood in the middle of the body In this case, thighbone extract B,H,L is inhibited by light, and the activity of thighbone extract is inhibited by light. The result is that the decomposition can be done in a timely manner. The development of a new inducer was successfully tested and the development of a specific inducer was successfully tested. The new E-64 inducer (CA-074) was administered intraperitoneally at a dose of 8mg/100g/body weight. The B activity of thighbone extract and liver tissue was significantly inhibited, and the H,L activity was completely affected. Under these conditions, the blood in the blood will be reduced. Therefore, the study of bone resorption drug development is progressing in the study of bone resorption drug development.

项目成果

N.Katunuma: "Molecular Aspects of Ammoniagenesis.Contributions to Nephrology Vol.92" S.Karger,Basel, 12 (1991)

N.Katunuma：“氨生成的分子方面。对肾病学的贡献第 92 卷”S.Karger，巴塞尔，12 (1991)

T.Towatari et al.: "Novel Epoxysuccinyl Peptides;A selective Inhibitor of Cathepsin B in Vivo" FEBS Lett.280. 311-315 (1991)

T.Towatari 等人：“新型环氧琥珀酰肽；体内组织蛋白酶 B 的选择性抑制剂”FEBS Lett.280。

M.Takahashi et al.: "Identification of Hematoxylin Stainable Protein in Epidermal Keratohyalin Granules as Phosphorylated Cystatin α by Protein Kinase C" FEBS Lett.287. 178-180 (1991)

M. Takahashi 等人：“通过蛋白激酶 C 将表皮角质透明蛋白颗粒中的苏木精染色蛋白鉴定为磷酸化半胱氨酸蛋白酶抑制剂 α”，FEBS Lett.287 (1991)。

M.Murata et al.: "Novel Epoxysuccinyl Peptides;Selective Inhibitors of Cathepsin B in Vitro" FEBS Lett.280. 307-310 (1991)

M.Murata 等人：“新型环氧琥珀酰肽；体外组织蛋白酶 B 的选择性抑制剂”FEBS Lett.280。

D.Musil et al.: "The Refined 2.15A Xーray Crystal Structure of Human Liver Cathepsin B:The Structural Basis for Its Specificity" The EMBO Journal. 10. 2321-2330 (1991)

D.Musil 等人：“人肝脏组织蛋白酶 B 的精制 2.15A X 射线晶体结构：其特异性的结构基础”《EMBO 杂志》10. 2321-2330 (1991)。