TNFによるHIV感染細胞の特異的致死機構に関する研究

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本年度はまずTNFによるHIV感染細胞の致死機構が所謂アポトーシスであるこを電子顕微鏡による形態変化の観察、ならびにヌクレオソーム リンカー サイズでのDNA切断の検出と言う2点から明かにした。さらにアポトーシス関連遺伝子Fasの発現がHIV感染細胞で有意に上昇していることをFas遺伝子cDNAを用いたノーザンブロッテング法及び細胞膜上のFas坑原をフローサイトメトリイーにより検出する事により明かにした。そこでHIV感染そのものがFas遺伝子の誘導を行なうかいなかを検討したところ、ヒトT細胞株MOLT‐4においてHIV感染ごFas遺伝子の誘導が細胞死に先だって起こることが明かとなった。一方HIV感染者の末梢血細胞の細胞表面をフローサイトメトリイーで調べたところ、健常人ではほとんど検出されないFas坑原が12例中4例で有意に検出された。これらの結果はHIV感染者でのCD4陽性細胞の減少がFas坑原を介したアポトーシスに拠っていることを強く示唆するものであると思われる。次の実験計画としてHIV感染によるFas遺伝子誘導機構を明かにすることを目的として、現在Fas遺伝子プロモーター領域のクローンニングを行なっている。またHIV遺伝子中にFas遺伝子誘導に関与するものが存在するかを明かにしていく計画である。さらにTNF受容体とFas坑原の関連を詳細に検討して行く予定である。アポトーシスという細胞死は従来ネクローシスに対比させて考えられてきたものであり、ウイルス感染に拠る細胞死は典型的なネクローシスに分類されてきている。我々の結果はしかしながらウイルス感染に拠る細胞死が生理的な意義を持つアポトーシスに分類される可能性を強く示しており、今後HIV以外のウイルス感染細胞死の機構に関しても詳細に検討をしていきたいと考えている。