インビボにおける脳内神経伝達物質の瞬時測定法に関する研究

体内大脑神经递质瞬时测量研究

基本信息

批准号：
04671392
负责人：
中原大一郎
金额：
$ 1.28万
依托单位：
Nagoya University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1992
资助国家：
日本
起止时间：
1992 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究の目的は,インビボ・ボルタンメトリーとマイクロダイアリシスを組み合わせることにより,脳内で起きている種々の神経伝達物質の変化を行動と対応させながら瞬時に測定できる実験システムを確立することであった。まず,インビボ・ボルタンメトリー用電極とマイクロダイアリシス用プローブを同一個体に同時に併用できるように小型化した。マイクロダイアリシス用プローブについては,すでにわれわれは慢性実験への応用が可能な着脱式のものを考案しているので,それを26Gの大きさにまで小型化した。インビボ・ボルタンメトリー用電極としては,先端径7〜30μmのガラス管被覆単一炭素繊維電極を作製し,これにマイナスに帯電した高分子ポリマー(Nafion)を薄く(約5μm)塗ったのものを用いた。次に,試験管内での神経化学的特性について調べた。マイクロダイアリシスプローブの特性は従来のもの(D.Nakahara et al.,Biagenic Amines,6:559-564,1989)にほぼ類似していた。Nationで被膜したボルタンメトリー電極はモノアミン伝達物質を感知するが,その代謝物質やアミノ酸は感知しないという性質を有した。この電極のモノアミンに対する感度は,ドーパミンに対して最も高く,つづいてセロトニン,ノルアドレナリンの順であった。また,還元反応電位に対する酸化反応電位の比の違いによってこれらの物質の識別が可能となった。以上のように,本研究で作製したインビボ・ボルタンメトリー用電極とマイクロダイアリシス用プローブを併用することにより,少なくともモノアミン伝達物質についてはインビボにおける定量的かつ瞬時的(最大100ミリ秒の時間分解能)な測定が可能になった。

这项研究的目的是建立一个实验系统，该系统可以通过结合体内伏安法和微透析来立即测量大脑中发生的各种神经递质的变化。首先，使体内伏安电量电极和微透析探针变小，以便可以与同一个体同时使用它们。至于微透析探针，我们已经设计了一个可拆卸的探针，可以应用于慢性实验，因此我们将其降低到26G的大小。当体内伏安法电极时，制造了玻璃管涂层的单个碳纤维电极，尖端直径为7-30μm，并将带电负电的聚合物聚合物（NAFION）的薄（约5μm）施加到该电极上。接下来，检查了体外神经化学特性。微透析探针的性能与常规探针的性质大致相似（D. Nakahara等，Biagenic胺，6：559-564，1989）。涂有国家的伏安电极具有未检测到单胺发射器而不是其代谢产物或氨基酸的特性。该电极对单胺的敏感性对于多巴胺最高，其次是5-羟色胺和去甲肾上腺素。此外，氧化电位与还原电位的比率差异使得分开这些物质成为可能。如上所述，通过使用本研究中产生的体内伏安挥发电极和微透析探针，至少可以在体内和瞬时在体内进行定量和瞬时测量（最高100毫秒）的体内（最高单胺发送器）（最高至100毫秒）。