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光合成細菌の分泌するモリブデン酵素のフォルディング中間体の解析

光合细菌分泌的钼酶折叠中间体的分析

基本信息

批准号：
06640843
负责人：
佐藤敏生
金额：
$ 1.22万
依托单位：
Hiroshima University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1994
资助国家：
日本
起止时间：
1994 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

脱窒光合成細菌のペリプラズム局在ノリブデン酵素、dimethyl sulfoxide reductase(DMSOR)のフォルディング機構を調べた。1、まず,in vitroで、精製DMSORを塩酸処理で補欠分子族のモリブデンコファクターをはずし、変性させた後のネイティブ構造へのフォルディングを調べた。変性タンパク質は未変性ゲル電気泳動で2本のバンドに分かれ、1本は完全還元型、もう1本はジスルフィドがランダムに形成されたものであった。この変性DMSORは不安定で、2時間後にはaggregationするせいか電気泳動上では認められなくなった。この系に大腸菌の分子シャペロンであるgroEL,groESを存在させると安定化され電気泳動上で認められた。この安定化作用はペリプラズム画分にも存在した。2、groEL,groES存在下でdithiothreitol(DTT)を添加すると、ランダムに形成したジスルフィド結合は完全還元型へ変換され、かつ、変性DMSORはネイティブ構造へ変換された。3、モリブデンコファクター欠損株から調製したスフェロプラストによって培地中に分泌されたDMSORは、ネイティブ構造とアンフォルド構造の二つが認められたが(J.Bact. 1994)、このアンフォルド構造は完全還元型であり、この分泌系では分子シャペロン様タンパク質も分泌されるせいか、このアンフォルド構造は安定で、groEL,groESを添加しても効果は無かった。4、以上の結果から、ペリプラズムに分子シャペロンと同様の働きをするタンパク質があり、ペリプラズムはジスルフィド結合を形成するために酸化的と考えられているがむしろ還元状態で正しいフォルディングが起こること、細胞膜から分泌されるときのDMSORは完全還元型であることを推定した。

The enzyme, dimethyl sulfoxide reductase(DMSOR) and the molecular mechanism of photosynthetic bacteria are used to regulate their metabolism. 1. In vitro, refined DMSOR acid treatment, complete molecular family, chemical structure, chemical structure The property is not changed, the property is not changed, the property is changed The DMSOR is unstable, and after 2 hours, the aggregation occurs. This is the first time that the bacteria have been isolated. The stabilization effect is very important. 2. In the presence of groEL,groES, dithotreitol (DTT) is added to the matrix to form a completely reducible matrix. 3. The structure of DMSOR, production structure and loss structure in the culture medium are recognized by J. Bact. 1994)The structure of this gene is completely reduced, and the secretion system is completely reduced. The structure of this gene is stable, and the groEL,groES are added. 4. The above results show that the molecular selection process and the synthesis process of DMSOR are different from each other.