脱窒光合成細菌における嫌気呼吸末端還元酵素のペリプラスミック空間への局在機構

反硝化光合细菌周质空间厌氧末端还原酶的定位机制

基本信息

  • 批准号:
    02640524
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 1.15万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
  • 财政年份:
    1990
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    1990 至 无数据
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

脱窒光合成細菌のDMSO呼吸末端還元酵素のペリラスミック空間への局在の機構を、主に免疫ブロッティング法で調べた。DMSOによる分子量80kDの成熟体酵素誘導に伴って分子量約2ー3kD大きいポリペプチドが現われた。このポリペプチドは、クロラムフェニコ-ルで蛋白合成を阻害した実験や、 ^<35>Sーメチオニンで蛋白をパルスラベルした後の追跡実験で、時間とともに減少した。その減少は脱共役剤のCCCPや、膜構造破壊剤のフェネチルアルアルコ-ルで阻害され、このポリペプチドは酵素前駆体であることが明らかになった。成熟体は既報のとうりペリプラスムに局在したが、前駆体はサイトプラズムと細胞膜に存在した。次に、膜結合前駆体は膜輸送の前で細胞膜の内側に突き出ているのか、膜輸送した後で外側に出ているのか、または膜輸送途中で両側に出ているのかを、生細胞とトポロジ-が正方向のスフェロプラスト、および逆方向のクロマトフォアを調製し、両者にプロテア-ゼを作用させて膜結合前駆体の消化を調べた。その結果どちらの膜標品でもプロテア-ゼによって消化され、前駆体は膜の両側に突き出ていることが明らかにされた。DMSO還元酵素はモリデンコファクタ-を1分子含む酵素である。培地中からMoを除いてDMSO還元酵素を誘導すると前駆体が蓄積することを認めた。その培地にMoを再添加すると成熟体への変換が回復した。培地にタングステンを添加するとやはり成熟体への変換は阻害された。この結果から、この酵素の膜輸送とモリブデンコファクタ-の蛋白への挿入が密接に共役していることが示された。
The regulation of DMSO respiratory terminal reductase in photosynthetic bacteria DMSO induced mature enzyme with molecular weight of 80kD The protein synthesis is blocked by the protein synthesis process, and the protein synthesis process is delayed <35>by the time. The CCCP of the active ingredient and the membrane structure of the active ingredient are reduced, and the enzyme precursor is reduced. The mature body is reported to be in the middle of the cell membrane, and the precursor body is in the middle of the cell membrane. The membrane transport of membrane binding precursor is regulated by the regulation of membrane binding precursor digestion. As a result, the membrane standard was removed from the membrane and the precursor was removed from the membrane. DMSO-reactive enzymes are present in the molecule. In addition, the enzyme can be induced by DMSO. Mature body changes due to re-addition of Mo to the culture medium The growth and development of the plant The results showed that the enzyme membrane transport was stable, and the enzyme membrane transport was stable.

项目成果

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    $ 1.15万
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