非還元型卵子を用いたクローン魚生産に関する研究

非减数蛋克隆鱼生产研究

• 批准号: 06660239
• 负责人: 荒井 克俊
• 金额: $ 0.51万
• 依托单位: Hiroshima University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-06660239/
• 关键词: 減数分裂; 非還元型卵子; 雌性発生; DNAフィンガープリント; ドジョウ; 倍数体; 組換え; アイソザイム

自然4nドジョウの精子と通常2nの卵子の受精に以来する2n×4n交配群の3n中,大型卵と小型卵を産することが判明している雌親魚を選び,成熟卵を得た。そして,3nの大型卵をUV照射精子で受精し,雌性発生を誘起した群(3n×UV)と受精後5分に,750kg/cm^2の圧力処理を1分間加え,極体放出阻止を行った群れ(3n×UV・PS)を作出した。染色体観察と赤血球長径測定より前者は3n,後者の一部は6nであることが判明した。これらの魚よりDNAを抽出し,HaeIII,HinfI,あるいはDraIIで切断後,33.6(セルマーク社製)をプローブとしてDNAフィンガープリント分析を行ったところ,雌性発生3n(3n×UV)供試魚の80%は雌親魚と同一のフィンガープリント像を示し,クローン固体となっていることが判明した。同じ雌に由来する雌性発生6n(3n×UV・PS)も同一のフィンガープリント像を示すことから,大型卵の形成にはApomixisが関与することが推察された。3n×UV群中,クローンとわずかに異なるフィンガープリント像を示す残り20%は,組換えにより生じるものと考えられる。雌性発生3n14個体中,12個体が雌親と同じAATアイソザイム表現型を示すのに対し,2個体が異なる表現型を示した事実も組換えの存在を示唆した。以上の研究より,2n×4nの交配に由来する3nは非還元的に卵を形成し,これら卵より生じる雌性発生3nの多数と,雌性発生6nの全個体は,遺伝的に同一のクローンであることが判明した。これらは新たな実験魚として広汎な応用が考えられるが,3nの卵形成において遺伝的組換えが生じる機構は不詳であった。今後,この点を含め研究をすすめることにより,減数分裂によらず配偶子形成が生じる機構解明を行う必要がある。

After fertilization of natural 4n sperm and usually 2n eggs, it is clear that in the 3n mating groups of 2n× 4n, large eggs and small eggs are produced. If female broodfish choose and mature eggs are obtained. 3n × UV irradiation of large eggs and sperm fertilization, female development and induction of groups (3n×UV) 5 minutes after fertilization,750kg/cm^2 pressure treatment and 1 minute increase, polar emission prevention of groups (3n×UV·PS). The length of erythrocytes was determined by chromosome observation. The former was 3n, while the latter was 6n. After DNA extraction,HaeIII,HinfI, HifI, HifI, Hif The origin of the same female is 6n(3n×UV·PS), and the formation of large eggs is related to the observation of the same female. 3n×UV group, the difference between the two groups is 20%, and the group is changed. Of the 3n14 females, 12 showed the same phenotype and 2 showed the same phenotype. In the above study, the origin of mating in 2n× 4n was determined by the number of eggs formed in 3n, the number of eggs produced by females was determined by the number of eggs produced in 3n, and the number of females produced in 6n. This is the first time that a person has ever been involved in an egg formation. In the future, this research will be carried out in order to clarify the mechanism of meiosis and mate formation.