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希少チョウザメ類の始原生殖細胞と生殖系列キメラに関する研究

珍稀鲟鱼原始生殖细胞及种系嵌合体的研究

基本信息

批准号：
09F09325
负责人：
荒井克俊
金额：
$ 0.77万
依托单位：
Hokkaido University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2009
资助国家：
日本
起止时间：
2009 至 2010
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-09F09325/
关键词：
Acipenser属 Huso属生殖質微細構造電子顕微鏡胚操作 PGC 希少種

项目摘要

本邦の希少種であるミカドチョウザメを含むチョウザメ類配偶子の微細構造を透過型電子顕微鏡で観察し、他の硬骨魚類とは異なり精子は先体を持ち、卵は複数(10)の卵門を持つことを示した。また、ミカドチョウザメ精子は他種に比べ著しく幅広い波動膜をを持つことを示した。一方、卵子は3層からなる卵膜と最外層のゼリー膜に囲まれていた。卵子の動物極に、多数のミトコンドリアに囲まれ、いわゆるnuageと言われる生殖質様の構造が電子密度の高い10ほどの粒子として見られた。排卵された卵では生殖質様構造は断片化され、植物極側の細胞質に拡散し、nuage-ミトコンドリア複合体としては観察されなかった。また、ミトコンドリアは少なく、ゴルジ体、小胞体も極めて少なかった。受精後の1細胞期から4細胞期の胚の植物極に、ゼブラフィッシュのnosl mRNAの3'UTR(3末端非翻訳領域)と緑色蛍光タンパクGFP遺伝子を結合させた人工mRNAを顕微注射して、始原生殖細胞(PGCs)の可視化を行った。そして、PGCsの位置と移動経路を蛍光顕微鏡下で観察したところ、受精後5日において前腎管と腸管の間にPGCsが見られ、これらの細胞集団は卵黄特区の後端領域に移動した。PGCsの蛍光シグナルが消失する受精後6-13日目では、PGCsは卵黄全体に沿って広がり分布した。単離したPGCsは電子顕微鏡観察のための固定処理を行った。PGCsの顕微移植によるキメラ作出は困難であったことから、精原細胞のみを単離する技法を開発し、将来の移植の準備を整えた。

This country's rare species of であるミカドチョウザメをcontaining むチョウザメ type spouse child has a fine structure and is a transmission type electron microscope. Observation of the bony fish, the sperm of the bony fish, the precursor of the sperm, the plural number of eggs (10), the egg gate of the fish, the sperm of the bony fish.また、ミカドチョウザメ sperm は He kind に比べしく width 広い undulating film ををhold つことを Show した. On one side, the egg has three layers of egg membrane and the outermost membrane is a membrane. Egg animal pole, many animals, many animals The structure of the germplasm and the structure of the electron density are high and the particles are high and the electron density is high. Ovulation is an egg and the reproductive plasm structure is fragmented, the cytoplasm of the extreme side of the plant is dispersed, and the nuage-ミトコンドリア complex is inspected.また, ミトコンドリアは小なく, ゴルジ体, 小cell体も极めて小なかった. The 1-cell stage after fertilization and the 4-cell stage of the embryo. The 3'UTR (3-terminal non-translated region) of the mRNA is combined with the green light source of GFP and the microinjection of artificial mRNA and the visualization of primordial germ cells (PGCs).そして、The location of PGCs was examined under a microscopic microscope by moving the path. Observation was carried out 5 days after fertilization. PGCs move between the pronephric duct and the intestinal duct, and move between the yolk duct and the back end of the yolk zone. The light of PGCs disappears at 6-13 days after fertilization, and the distribution of PGCs along the entire yolk surface occurs. The isolation and fixation of PGCs using electron microscopy were carried out. The micro-transplantation of PGCs is difficult and difficult, the spermatogonia are separated and the technique is open, and the preparation for future transplantation is complete.