軟骨組織における骨形成因子(BMP)の発現と機能

骨形态发生蛋白（BMP）在软骨组织中的表达及功能

• 批准号: 06671857
• 负责人: 能城 光秀
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Hiroshima University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-06671857/
• 关键词: 軟骨細胞; BMP; RT-PCR

本研究は、軟骨細胞分化におけるBone Morphogenic Protein(BMP)の生理的役割を解明し、さらに新たなBMP分子種を検索することを目的としており、今年度は以下のような事を明らかにした。1.各種BMP分子種を区別して検出する事の出来るPCRプライマーを設計し、ウサギ成長板軟骨細胞培養系における各種BMPの発現を、培養10、20、50日後の成長板軟骨細胞よりmRNAを調製し、RT-PCR法により比較検討を行った。(i)BMP2および4は各分化段階において常に発現しており、その発現レベルは各分化段階を通じて維持されていることが示唆された。(ii)BMP3、5、6および7は各分化段階において常に発現を認めたが、BMP2および4とは異なり、高度に分化していく過程で発現レベルが低下することが示唆された。この結果から、これまで骨細胞等の各種細胞株で示されている各種BMPが軟骨細胞においても存在していること、また軟骨細胞の分化と関連して各種BMPのmRNA発現レベルが異なることが示唆された。2.軟骨形成能を持つことで知られる多型性腺腫における各種BMPの発現を、in vivoおよびin vitroの多型性腺腫細胞よりmRNAを調製し、RT-PCR法にて正常唾液腺細胞との比較検討を行った。(i)in vivoおよびin vitroの発現の比較では、両者ともに発現を認めた。またこの発現レベルはin vivoおよびin vitroでは差は認められなかった。(ii)多型性腺腫細胞と正常唾液腺細胞の比較では、PCR産物に明らかにサイズの異なるものを複数認めた。この結果から、多型性腺腫細胞に認められたBMP分子種はこれまでに報告のあるものとは明らかに異なるものであり軟骨形成に関与する新たなBMP分子種である可能性が示唆された。

This study は, cartilage cell differentiation に お け る ipads Morphogenic Protein (BMP) cut を の physical service interpret し, さ ら に new た な BMP molecules of を 検 cable す る こ と を purpose と し て お り, under our は の よ う な matter を Ming ら か に し た. 1. A variety of molecular of BMP を difference し て 検 out す の る things る PCR プ ラ イ マ ー を design し, ウ サ ギ growth plate cartilage cell culture is に お け る various BMP の 発 を now, training after 10, 20, 50 の growth plate chondrocytes よ り mRNA を modulation し, rt-pcr method に よ り compare 検 line for を っ た. (I) BMP2 お よ び 4 は each differentiation Duan Jie に お い て often に 発 now し て お り, そ の 発 now レ ベ ル は each differentiation Duan Jie を tong じ て maintain さ れ て い る こ と が in stopping さ れ た. (ii) BMP3, 5, and 6 お よ び 7 は each differentiation Duan Jie に お い て often に 発 を now recognize め た が, BMP2 お よ び 4 と は different な り, highly に differentiation し て い く process で 発 now レ ベ ル が low す る こ と が in stopping さ れ た. こ の results か ら, こ れ ま で bone cells and so on various cell lines で の shown さ れ て い る various BMP が chondrocytes に お い て も exist し て い る こ と, ま た cartilage cells の と masato even し て various BMP の mRNA 発 now レ ベ ル が different な る こ と が in stopping さ れ た. 2. Cartilage formation can を hold つ こ と で know ら れ る polymorphism gonad swollen に お け る various BMP の 発 を, in vivo お よ び in vitro の polymorphism gonad swollen cells よ り mRNA を modulation し, rt-pcr method に て normal salivary gland cells と の is 検 line for を っ た. (i)in vivoおよびin vitro <s:1> occurrence <s:1> comparison で で and と に occurrence を recognize めた. Youdaoplaceholder0 レベ レベ レベ レベ in vivoおよびin vitroで で difference <e:1> recognition められな った った. (ii) polymorphism gonad と normal salivary gland swollen cells の is で は に Ming, PCR products ら か に サ イ ズ の different な る も の を plural recognize め た. こ の results か ら に, more sex gland swollen cells to recognize め ら れ た BMP molecules of は こ れ ま で に report の あ る も の と は Ming ら か に different な る も の で あ り cartilage formation に masato and す る new た な BMP molecules of で あ が る possibility in stopping さ れ た.

项目成果

Ohyama,Y.: "Identification of a Vitamin D Response Element in 5'Flanking Region of Rat 25-Hydroxyvitamin D_3 24-Hydroxylase Gene." J.Biol.Chem.269. 10545-10550 (1994)

Ohyama,Y.：“大鼠 25-羟基维生素 D_3 24-羟化酶基因 5 侧翼区域维生素 D 响应元件的鉴定。”

Fujita,Y.: "A Novel Heparin-Binding Protein,HBp15 Is Identifed as Mammalian Ribosomal Protein L22." Biochem.Biophys.Res.Commun.199. 706-713 (1994)

Fujita,Y.：“一种新型肝素结合蛋白 HBp15 被鉴定为哺乳动物核糖体蛋白 L22。”

Akiyoshi-Shibata,M: "Further Oixdation of Hydroxycalcidiol by Calcidiol 24-Hydroxylase.A Study with the Mature Enzyme Expressed in Escherichia coli." Eur.J.Biochem.224. 335-343 (1994)

Akiyoshi-Shibata，M：“骨化二醇 24-羟化酶对羟基骨化二醇的进一步氧化。利用大肠杆菌中表达的成熟酶进行的研究。”

Nishimura,A: "Reglation of Messenger Ribonucleic Acid Expression of1α,25-Dihydroxyvitamin D_3-24-Hydroxylase in Rat Osteoblast." Endocrinol.134. 1794-1799 (1994)

Nishimura, A：“大鼠成骨细胞中 1α,25-二羟基维生素 D_3-24-羟化酶的信使核糖核酸表达的调节。134-1799 (1994)”

Shirakawa,M: "Transforming Growth Factor-beta-1 Reduces Alkaline Phosphatase mRNA and Activity and Stimulates Cell Proliferation in Cultures of Human Pulp Cells." J.Dent.Res.73. 1509-1514 (1994)

Shirakawa,M：“转化生长因子-β-1 降低碱性磷酸酶 mRNA 和活性，并刺激人牙髓细胞培养物中的细胞增殖。”