体内プテリジン化合物の各種病態におけ作用機序

蝶啶类化合物在体内各种病理状态下的作用机制

• 批准号: 06672304
• 负责人: 内山 幸信
• 金额: --
• 依托单位: Kitasato University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-06672304/
• 关键词: ネオプテリン; プテリジン; テトラヒドロビオプテリン

ネオプテリン(Neo)はGTPから誘導されたテトラヒドロビオプテリンの中間代謝産物である.Neoはγ-インターフェロン,ウィルス,微生物等により活性化された単球・マクロファージから産生される.感染症,敗血症,自己免疫疾患,悪性腫瘍,移植後拒絶反応等において血中Neoの上昇が言われている.従来,HPLC法やRTA法により尿中Neoを測定したが,定量操作が煩雑であり且つクレアチニン補正を必要とした.今回,我々はenzyme immunoassayという新しい血清Neo定量法の基礎的検討を実施し,更に基準値を求めた.方法はMerck社製の測定系によった.Neo抗体で被覆したマイクロウェルへ生食水を注ぎ,30分間活性化させた後吸引除去した.次いで,preincubation buffer並びに標準液,コントロール血清,被検血清を加え30分間放置.更にペルオキシダーゼ標識Neoを加え60分間競合結合せしめた.ウェル内の溶液を吸引し,生食水により3回洗浄し,非結合Neoを吸引除去した.基質として2,2´-azinobis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid),diammonium salt[ABTS]を加え,30分間孵置.反応系は緑色を呈した.その後NaN_3を加え,反応を停止.1時間以内に405/630nm下で吸光度を求め,検量線より被検血清中のNeo値を得た.その結果,最小検出限界:0.9nmol/L.測定範囲:0.9〜200nmol/Lであった.低濃度(11nmol/L),中等度濃度(80nmol/L),高濃度(134nmol/L)の同時再現性はCV6.4〜8.2%.同3濃度の日差再現性はCV7.4〜16.0%であった.同様3濃度被検液へのNeoの添加回収率は92〜100%であった.低・中・高濃度共に16倍希釈まで希釈直線性が示された.健常人199名の血清Neoの基準値は3.1±3.9nmol/Lであり,従来法とほぼ同様であった.以上より,本法は感度,再現性,回収率,希釈直線性共に良好であり,日常検査へ導入し得ることが充分評価された.また今回の成果より今後の研究の為の基準値が決定された.

ネオプテリン(Neo)はGTPからinduced されたテトラヒドロビオプテリンのintermediate metabolite である.Neoはγ-インターフェロン, ウィルス, microorganisms and other により activated された単単・マクロファージからproduce される. Infectious diseases, septicemia, automatic Autoimmune diseases, inflammatory tumors, rejection of reflux after transplantation, etc., the rise of Neo in the blood, the HPLC method and the RTA method. It is necessary to measure the amount of Neo in urine, and it is necessary to correct the quantitative operation. This time, I will enzyme Immunoassay is based on the new serum Neo quantitative method and is based on the standard method. The method is based on the measurement system made by Merck.った.Neo antibody is coated and したマイクロウェルへraw water is injected, activated in 30 minutes and then removed by suction, preincubation The buffer standard solution, the standard solution, the serum, and the serum were added and placed in intervals of 30 minutes. Update the solution.ルオキシダーゼLOGO Neo をplus 60 minutes competition and cooperation せしめた. ウェル内のsolution をattractionし, wash with raw water 3 times, non-binding Neo を is attracted to remove した. Substrate 2,2´-azinobis (3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid), diammonium salt[ABTS]をaddえ, incubate for 30 minutes. The reaction system is green and the green color is した. After the reaction, NaN_3 is added, and the reaction is stopped. 1 Within the time, the absorbance at 405/630nm is obtained. The measurement line is obtained by the Neo in the serum. The result is the minimum limit. Limit: 0.9nmol/L. Measurement range: 0.9~200nmol/L. Low concentration (11nmol/L), medium concentration (80nmol/L), high concentration (134nmol/L). Simultaneous reproducibility is CV6.4~8.2%. Same as 3 concentrations with daily difference. The reproducibility is CV7.4~16.0%, and the recovery rate of the same 3-concentration solution as Neo-Neo is 92~100%. .A total of 16 times of low, medium, and high concentrations were used to show linearity. The serum Neo reference value of 199 healthy people was 3.1±3. 9nmol/L is the same as the original method. Above all, this method has good sensitivity, reproducibility, recovery rate and linearity.であり, daily inspection and introduction, しget ることが, fully evaluate 価された. またThis chapter’s results and のresearch in the future are のbaseline values ​​and された.

项目成果

内山幸信: "Enzyme immunoassayを用いた血清ネオプテリン測定系の検討" 臨床病理. 43. (1995)

Yukinobu Uchiyama：“使用酶免疫测定法的血清新蝶呤测量系统的研究”临床病理学43。（1995）